Глава 12. Исследование экссудатов и транссудатов.

Виды пунктатов.

Транссудат (от «транс» и лат. sudo – «просачиваюсь») – жидкость, скапливающаяся при общих и местных нарушениях кровообращения; невоспалительный выпот, результат пропотевания сыворотки крови. От воспалительного выпота (экссудата) отличается главным образом низким содержанием белка (табл. 49).

Транссудаты (невоспалительные жидкости) появляются вследствие разнообразных причин:

1) при повышении венозного давления (правожелудочковая недостаточность сердца, портальная гипертония на почве тромбоза воротной вены, цирроза печени, адгезивный перикардит);

2) при снижении онкотического давления в сосудах (заболевания, протекающие с гипопротеинемией: нефротический синдром различной этиологии, тяжелые поражения печени, кахексия);

3) при нарушениях обмена электролитов, главным образом повышении концентрации натрия (гемодинамическая сердечная недостаточность, нефротический синдром, цирроз печени);

4) при увеличении продукции альдостерона и некоторых других состояниях.

Таблица 49.

Дифференциально-диагностические признаки транссудатов и экссудатов.

Экссудат (exsudatio; от лат. exsudare – «потеть») – выпотевание белоксодержащей жидкой части крови через сосудистую стенку в воспаленную ткань. Соответственно жидкость, выходящая при воспалении из сосудов в ткань, называется экссудатом. Термины «экссудат» и «экссудация» употребляются только по отношению к воспалению. Они призваны подчеркнуть отличие воспалительной жидкости (и механизма ее образования) от межклеточной жидкости и транссудата (например, при экссудативном плеврите).

Механизм экссудации включает 3 основных фактора:

1) повышение проницаемости сосудов (венул и капилляров) в результате воздействия медиаторов воспаления и в ряде случаев самого воспалительного агента;

2) увеличение кровяного (фильтрационного) давления в сосудах очага воспаления вследствие гиперемии;

3) возрастание осмотического и онкотического давления в воспаленной ткани в результате альтерации и начавшейся экссудации и, возможно, снижение онкотического давления крови из-за потери белков при обильной экссудации.

Сохраняющееся динамическое равновесие между данными механизмами обеспечивается тем, что всасывающая способность плевры у здорового человека почти в 3 раза превышает ее секретирующую способность, поэтому в плевральной полости содержится лишь незначительное количество жидкости.

Ведущим фактором экссудации является повышение проницаемости сосудов. Оно, как правило, является двухфазным и включает немедленную и замедленную фазы. Первая возникает вслед за действием воспалительного агента, достигает максимума на протяжении нескольких минут и завершается в среднем в течение 15–30 мин. Вторая фаза развивается постепенно, достигает максимума через 4–6 ч и длится иногда до 100 ч в зависимости от вида и интенсивности воспаления. Следовательно, экссудативная фаза воспаления начинается немедленно и продолжается более 4 суток.

Преходящее повышение проницаемости сосудов в немедленной фазе обусловлено главным образом контрактильными явлениями со стороны эндотелиальных клеток. При этом в реакцию вовлекаются преимущественно венулы. В результате взаимодействия медиаторов со специфическими рецепторами на мембранах эндотелиальных клеток происходит сокращение актиновых и миозиновых микрофиламентов цитоплазмы клеток, округляются эндотелиоциты; две соседние клетки отодвигаются друг от друга, и между ними появляется межэндотелиальная щель, через которую и осуществляется экссудация. Стойкое увеличение проницаемости сосудов в замедленной фазе связано с повреждением сосудистой стенки лейкоцитарными факторами – лизосомальными ферментами и активными метаболитами кислорода. При этом в процесс вовлекаются не только венулы, но и капилляры.

По отношению к сосудистой проницаемости медиаторы воспаления могут быть разделены на 2 группы:

1) прямодействующие, влияющие непосредственно на эндотелиальные клетки, вызывая их контракцию, – гистамин, серотонин, брадикинин, С5а, С3а, лейкотриены С4 и D4;

2) нейтрофилзависимые, эффект которых опосредуется лейкоцитарными факторами. Такие медиаторы неспособны повышать проницаемость сосудов у лейкопенических животных. Это компонент комплемента С5а des Arg, лейкотриен В4, цитокины, в частности интерлейкин-1, отчасти фактор, активирующий тромбоциты.

Повышенная проницаемость сосудов в сочетании с увеличенным фильтрационным давлением крови, осмотическим и онкотическим давлением ткани обеспечивает выход жидкой части крови из сосуда и задержку ее в ткани. По некоторым данным, экссудация осуществляется также путем фильтрации и диффузии через микропоры в самих эндотелиальных клетках (трансцеллюлярные каналы), а также не столько пассивным путем, сколько активным – с помощью так называемой микровезикуляции, состоящей в микропиноцитозе эндотелиальными клетками плазмы крови, транспорте ее в виде микропузырьков (микровезикул) по направлению к базальной мембране и выбросе ее в ткань.

Поскольку повышение проницаемости сосудов при воспалении наблюдается в значительно большей степени, чем при любом из невоспалительных отеков, даже при которых этот фактор является ведущим, количество белка в экссудате превышает таковое в транссудате. В свою очередь, отличие в степени повышения проницаемости сосудов при воспалительных и невоспалительных отеках обусловлено разницей в количествах и наборе высвобождаемых биологически активных веществ. Например, лейкоцитарные факторы, повреждающие сосудистую стенку, играют важную роль в патогенезе экссудации и мало участвуют при невоспалительных отеках.

Степенью повышения проницаемости сосудов определяется и белковый состав экссудата. При сравнительно небольшом увеличении проницаемости могут выйти только мелкодисперсные альбумины, по мере дальнейшего повышения – глобулины и, наконец, фибриноген.

Экссудаты образуются в результате воспалительных процессов, вызываемых разнообразными причинами. Различают экссудаты:

1) серозные и серозно-фибринозные (при экссудативных плевритах и перитонитах туберкулезной этиологии, ревматических плевритах);

2) геморрагические (чаще всего при злокачественных новообразованиях и травматических поражениях плевры, брюшины, перикарда, реже – при инфаркте легкого, остром панкреатите, геморрагических диатезах, туберкулезе);

3) хилезные (при затруднении лимфооттока через грудной проток вследствие сдавления опухолью, увеличенными лимфатическими узлами, а также при разрыве, обусловленном травмой или опухолью);

4) хилусоподобные (при хронических воспалениях серозных оболочек вследствие обильного клеточного распада с жировым перерождением);

5) псевдохилезные (молочный вид этих экссудатов обусловлен не увеличенным содержанием жира, как в хилезных, а своеобразным изменением белка, наблюдается иногда при липоидной дистрофии почек);

6) холестериновые (при застарелых осумкованных выпотах в плевральную, брюшную или перикардиальную полость);

7) гнилостные (при огнестрельных ранениях и присоединении гнилостной флоры);

8) гнойный.

Рассмотрим несколько подробнее характеристику отдельных видов экссудатов.

Серозный экссудат характеризуется умеренным содержанием белка (3–5%), в основном мелкодисперсного (альбумин), и небольшим количеством полиморфно-ядерных лейкоцитов, вследствие чего имеет невысокий удельный вес (1015–1020) и является достаточно прозрачным. По составу наиболее близок к транссудату.

Характерен для воспаления серозных оболочек, реже встречается при воспалении в паренхиматозных органах. Экссудат при серозном воспалении слизистых оболочек характеризуется большой примесью слизи. Такое воспаление называется катаральным. Чаще всего серозный экссудат наблюдается при ожоговом, вирусном, аллергическом воспалениях.

Фибринозный экссудат отличается высоким содержанием фибриногена, что является результатом значительного повышения проницаемости сосудов. При контакте с поврежденными тканями фибриноген превращается в фибрин и выпадает в виде ворсинчатых масс (на серозных оболочках) или пленки (на слизистых), вследствие чего экссудат уплотняется. Если фибринозная пленка рыхлая, поверхностная, легко отделяется без нарушения целостности слизистой, такое воспаление называется крупозным. Оно наблюдается в желудке, кишечнике, трахее, бронхах. В том случае, когда пленка плотно спаяна с подлежащей тканью и при ее удалении обнажается язвенная поверхность, речь идет о дифтеритическом воспалении. Оно характерно для миндалин, полости рта, пищевода. Такое различие обусловлено характером эпителия слизистой оболочки и глубиной повреждения. Фибринозные пленки могут самопроизвольно отторгаться благодаря аутолизу, развертывающемуся вокруг очага, и выходить наружу, подвергаться ферментативному расплавлению, прорастанию соединительной тканью с образованием соединительнотканных сращений, или спаек. Фибринозный экссудат может наблюдаться при дифтерии, дизентерии, туберкулезе.

Гнойный экссудат характеризуется наличием большого количества полиморфно-ядерных лейкоцитов, главным образом погибших и разрушенных (гнойные тельца), ферментов, продуктов аутолиза тканей, альбуминов, глобулинов, иногда – нитей фибрина, особенно нуклеиновых кислот, обусловливающих высокую вязкость гноя. Вследствие этого гнойный экссудат является достаточно мутным, с зеленоватым оттенком. Он характерен для воспалительных процессов, вызванных кокковой инфекцией, патогенными грибками или химическими флогогенами, такими как скипидар, отравляющие вещества. Нередко гнойный экссудат бывает окрашен в красно-бурый или бурый цвет от примеси крови или кровяного пигмента. Под микроскопом видно огромное количество гнойных клеток: одни из них хорошо сохранившиеся, другие сморщены, зернисты, нередко в стадии полного распада.

При оформившейся эмпиеме – сплошная масса детрита и отмерших гнойных клеток, жировые капли, иногда кристаллы гематоидина и холестерина и почти всегда обильная микрофлора. Своеобразная и нечасто встречающаяся картина наблюдается при так называемой плевральной эозинофилии. В этих случаях до 75% клеток плеврального выпота являются эозинофильными полинуклеарами, тогда как обычно их встречается 1–5%. В крови обычно в этих случаях эозинофилия отсутствует. Массивная эозинофилия (до 75–80%) может наблюдаться и при повторных пункциях в стадии резорбции гемоторакса.

Гнилостный экссудат отличается наличием продуктов гнилостного разложения тканей, вследствие чего имеет грязно-зеленую окраску и крайне неприятный запах индола и скатола. Образуется в случае присоединения патогенных анаэробов. Под микроскопом обнаруживаются гнойные шарики, сильно дегенерированные, много кристаллов холестерина и жирных кислот, иногда кристаллы гематоидина, масса различных микроорганизмов.

Геморрагический экссудат характеризуется большим содержанием эритроцитов, что придает ему розовый или красный цвет. Характерен для туберкулезных поражений (туберкулезного плеврита), чумы, сибирской язвы, черной оспы, токсического гриппа, аллергического воспаления, т. е. при воздействии высоковирулентных агентов, бурно протекающем воспалении, сопровождающемся значительным повышением проницаемости и даже разрушением сосудов. Геморрагический характер может принять любой вид воспаления – серозный, фибринозный, гнойный. Геморрагические экссудаты наблюдаются при злокачественных новообразованиях плевры, цинге, геморрагических диатезах, а также при огнестрельных ранениях грудной клетки. При огнестрельных ранениях по числу эритроцитов можно судить, продолжается ли кровотечение или оно прекратилось. Если кровотечение продолжается, то число свежих эритроцитов не меняется; если оно прекратилось, то число таких эритроцитов уменьшается. В стадии резорбции после ранений много эозинофилов и макрофагов с заглоченными эритроцитами и их обломками и значительное количество клеток мезотелия.

Молочновидные экссудаты объединяют хилезные, хилусоподобные и псевдохилезные экссудаты, так как они имеют вид разбавленного молока с зеленоватым отблеском.

Хилезные экссудаты происходят от разрыва лимфатических сосудов и истечения хилуса. Такие экссудаты главным образом наблюдаются в полости брюшины, но бывают и в плевральной полости вследствие разрыва грудного протока, межреберных и легочных лимфатических сосудов. Молочный вид их обусловливается присутствием большого количества жира, который легко отстаивается и образует верхний сливкообразный слой.

Под микроскопом в них определяют капельки жира, окрашивающиеся в черный цвет от осмиевой кислоты и в красный – от Судана 3; кроме того, в них находят очень много красных кровяных клеток, лимфоцитов и немного полинуклеаров. Прибавление к хилезному экссудату одного эфира или эфира с предварительным подщелачиванием несколькими каплями раствора едкого калия быстро осветляет экссудат. Хилезные экссудаты произвольно свертываются, но не вполне за один раз – свертки фибрина появляются в них повторно.

Хилусоподобные экссудаты встречаются чаще, чем хилезные; они происходят вследствие хронического воспаления серозных оболочек и обыкновенно наблюдаются: в брюшной полости – при атрофическом циррозе печени, в полостях плевры – при туберкулезе, сифилисе и злокачественных новообразованиях плевры. Молочный вид этих экссудатов зависит от распавшихся перерожденных клеток. Вообще жира в них бывает значительно меньше, чем в хилезных экссудатах, но под микроскопом он выглядят обычно в форме более крупных жировых шариков; наряду с последними встречается также масса перерожденных клеток.

Псевдохилезные экссудаты имеют также вид разбавленного молока, но вовсе не содержат жира; если же они содержат жир, то в очень небольших количествах – меньше того количества, которое необходимо, чтобы жир служил причиной белого цвета жидкости (менее 0,15%). От чего зависит цвет таких жидкостей, определенно сказать нельзя. Одни авторы объясняют его белковыми телами, другие – мукоидным веществом, третьи – особым агрегатным состоянием частиц глобулина, четвертые – нуклеинами и мукоидами и, наконец, некоторые – лецитином. Псевдохилезные экссудаты при стоянии не образуют сливкообразного слоя и не осветляются от прибавления эфира: от осмиевой кислоты они приобретают лишь коричневый оттенок или даже вовсе не изменяют своего цвета. Обычно не свертываются или дают ничтожное количество фибрина. Псевдохилезные экссудаты встречаются при липоидной дегенерации почек.

Смешанные экссудаты наблюдаются при воспалении, протекающем на фоне ослабления защитных сил организма и при присоединении вследствие этого вторичной инфекции. Различают серозно-фибринозный, серозно-гнойный, серозно-геморрагический, гнойно-фибринозный экссудаты.

Биологическое значение экссудации состоит в том, что, являясь одним из основных компонентов воспаления как патологического процесса, она выполняет вместе с тем важную защитную роль, которая заключается в следующем. Экссудация обеспечивает поставку в ткань плазменных медиаторов – активных компонентов комплемента, кининов, факторов свертывающей системы, ферментов плазмы, биологически активных веществ, высвобождаемых активированными клетками крови. Совместно с тканевыми медиаторами они участвуют в умерщвлении и лизисе микроорганизмов, привлечении лейкоцитов крови, опсонизации патогенного агента, стимуляции фагоцитоза, раневом очищении, репаративных явлениях. С экссудатом из тока крови в очаг выходят продукты обмена, токсины, т. е. очаг воспаления выполняет дренажную элиминативную функцию. С другой стороны, вследствие свертывания лимфы в очаге, выпадения фибрина значение экссудата в усугублении венозного застоя и тромбирования венозных и лимфатических сосудов повышается, так как он участвует в задержке в очаге микробов, токсинов, продуктов обмена.

Вместе с тем при определенных условиях экссудация может приводить к осложнениям воспалительного процесса – поступлению экссудата в полости тела с развитием, например, плеврита, перикардита, перитонита; сдавлению близлежащих органов; гноеобразованию с развитием абсцесса, эмпиемы, флегмоны, пиемии. Образование спаек может вызвать смещение и нарушение функций органов. Большое значение имеет локализация воспалительного процесса. Так, например, образование на слизистой оболочке гортани при дифтерии фибринозного экссудата может привести к асфиксии.

Пункция плевральной полости.

Для уточнения диагноза и исследования экссудата больным проводят пункцию плевральной полости. Это самый распространенный и эффективный способ лечения поражений плевры при туберкулезе. Плевральную пункцию проводят с диагностической целью для подтверждения наличия патологического содержимого в плевральной полости и направления его на бактериологическое, цитологическое и биохимическое исследования. С лечебной целью проводят эвакуацию содержимого плевральной полости и введение лекарственных препаратов.

Для проведения плевральной пункции используют длинные иглы (8–10 см) среднего калибра (более 1 мм) с острым срезом и канюли к ним. Игла соединяется со шприцем посредством крана, пластмассовой или резиновой трубки. При больших свободных выпотах пункцию осуществляют в VII—VIII межреберье по задней подмышечной линии, а при осумкованных место пункции определяют рентгенологически.

Пункцию проводят в процедурном кабинете или перевязочной. Возможна премедикация. Врач работает в маске, предварительно обрабатывает руки и надевает перчатки.

В месте вкола проводят местную анестезию межреберья.

Место вкола обрабатывают спиртовым раствором йода.

Указательным пальцем левой руки нащупывают верхний край нижнего (в заданном межреберье) ребра и по нему, точно над ребром, по его краю (чтобы не поранить межреберные сосуды и нервы) иглой с надетой на нее трубкой, зажатой зажимом, или иглой, насаженной на шприц (чтобы не произошло вхождения воздуха в плевральную полость), коротким движением прокалывают кожу, клетчатку, межреберные мышцы и париетальный листок плевры. Попадание в плевральную полость ощущается как провал иглы.

К наружному концу трубки присоединяют шприц, первые порции содержимого отправляют на анализ, а затем, присоединив трубку к отсасывающему аппарату и сняв зажим, начинают эвакуировать экссудат. Большое количество жидкости следует удалять медленно во избежание быстрого смещения органов средостения.

Важно на всех этапах процедуры максимально соблюдать герметичность. Затем иглу быстро извлекают, обрабатывают место пункции спиртовым раствором йода и заклеивают стерильной наклейкой.

Дренаж. После диагностической плевральной пункции при необходимости постоянного удаления содержимого устанавливают дренажную силиконовую трубку с внутренним диаметром не менее 4 мм. Для установки дренажа используют троакар – стальной остроконечный стилет с просветом внутри. Он предназначен для прокола грудной клетки и проведения через него дренажной трубки. Обычно трубку герметично закрепляют в грудной стенке, чем обеспечивают закрытое дренирование, которое может быть пассивным и активным.

Физико-химические свойства полостных жидкостей.

Цвет и прозрачность полостных жидкостей зависят от их характера. Транссудаты и серозные экссудаты имеют светло-желтый цвет, прозрачные. Остальные виды экссудатов в большинстве случаев мутные, различного цвета. Характер экссудата устанавливается обычно при осмотре жидкости: серозный – жидкость прозрачная, соломенно-желтого цвета; гнойный – жидкость вязкая, сливкообразная; геморрагический – жидкость кровянистая или красновато-бурого цвета; хилезный – в виде молока.

Если уровень гематокрита экссудата превышает 50% верхней нормы гематокрита крови – экссудат геморрагический. Хилезным экссудат может считаться при содержании триглицеридов в нем более 100 мг%.

Относительную плотность полостных жидкостей определяют с помощью урометра. Транссудаты имеют меньшую относительную плотность, чем экссудаты. Относительная плотность транссудатов колеблется от 1005 до 1015; относительная плотность экссудатов обычно выше 1018.

Содержание белка и его определение проводят теми же методами, что и в моче, или аналогично определению белка в сыворотке крови с помощью рефрактометра; выражают результаты в граммах на литр. В транссудатах содержится 5–25 г/л белка, а в экссудатах – более 30 г/л. Имеет значение и качественный состав белков. Так, соотношение альбуминов и глобулинов в транссудатах и экссудатах различно: в транссудатах альбуминово-глобулиновый индекс равен 2,5–4,0; в экссудатах он составляет 0,5–2,0.

Для более детального исследования белковых фракций пользуются методом электрофореза.

Унифицированный метод количественного определения белка.

Принцип метода основан на том, что салициловая кислота вызывает денатурацию белка (помутнение). Интенсивность помутнения пропорциональна концентрации белка.

Специальное оборудование: фотоэлектроколориметр.

Ход исследования.

В связи с высоким содержанием белка в транссудатах и экссудатах их перед исследованием разводят 0,9%-ным раствором натрия хлорида. Степень разведения ориентировочно устанавливают по реакции с сульфосалициловой кислотой. После этого готовят основное разведение выпотных жидкостей 1 : 100, для чего к 0,1 мл экссудата или транссудата добавляют 9,9 мл 0,9%– ного раствора натрия хлорида. При необходимости (большое содержание белка) степень разведения можно увеличить. В пробирку вносят 1,25 мл разведенной жидкости и 3,75 мл 3%-ного раствора сульфосалициловой кислоты, содержимое перемешивают. Через 5 мин фотометрируют при длине волны 590–650 нм (оранжевый или красный светофильтр) в кювете с длиной оптического пути 0,5 см против контрольной пробы, в которую вместо сульфосалициловой кислоты вносится 3,75 мл 0,9%-ного раствора натрия хлорида.

Расчет производят по калибровочному графику с учетом разведения пробы (табл. 50). Для построения графика из стандартного раствора альбумина готовят разведения и обрабатывают их как опытные пробы.

Таблица 50.

Построение калибровочного графика.

Примечание.

Прямолинейная зависимость калибровочного графика сохраняется до концентрации белка 1000 мг/мл. В экссудатах содержится от 30 до 80 г/л белка, тогда как в транссудатах – 5–25 г/л.

Проба Ривальта была предложена также для дифференцирования транссудатов и экссудатов.

Принцип метода.

Транссудаты содержат серомуцин (соединение глобулиновой природы), дающий положительную пробу (денатурацию) со слабым раствором уксусной кислоты.

Ход определения.

В цилиндр наливают 100–150 мл дистиллированной воды, подкисляют 2–3 каплями ледяной уксусной кислоты и добавляют по каплям исследуемую жидкость. Падающая капля экссудата образует помутнение в виде белого облачка, опускающегося до дна сосуда. Капля транссудата не образует помутнения, или оно бывает незначительным и быстро растворяется. Несмотря на указанные различия экссудатов и транссудатов, разграничить их на практике не всегда легко, так как иногда приходится иметь дело с рядом переходных жидкостей, а также экссудатами, которые по содержанию белка и относительной плотности стоят близко к транссудатам. Предложенная таблица 51 поможет разобраться в отличиях выпотных жидкостей.

Таблица 51.

Отличие транссудата от экссудата.

Большое значение для различения транссудатов и экссудатов имеет микроскопическое исследование.

Микроскопическое исследование.

Микроскопическое исследование позволяет детально изучить клеточный состав пунктата. Цитологическому исследованию подвергаются препараты, полученные из осадка после центрифугирования жидкости.

Экссудаты, доставленные в лабораторию в свернувшемся виде, подвергаются дефибринированию путем взбалтывания стеклянными бусами. До окраски препараты рекомендуется изучить в нативном виде под покровным стеклом.

Нативные препараты.

Исследование нативных препаратов дает возможность ориентировочно оценить количество клеточных элементов, качественный состав осадка, наличие подозрительных на атипичные клетки конгломератов и др. Техника приготовления препаратов обычная: каплю осадка наносят на предметное стекло и накрывают покровным. Препараты рассматриваются сначала под малым, а затем под большим увеличением. При исследовании на клетки злокачественного новообразования жидкость центрифугируют повторно не менее 5–6 раз, сливая надосадочный слой после каждого центрифугирования и вновь наливая исследуемую жидкость. В нативном препарате можно обнаружить определенные элементы.

Эритроциты в том или ином количестве присутствуют в любой жидкости. В транссудатах и серозных экссудатах их выявляют в небольшом количестве; в геморрагических экссудатах они обычно покрывают все поле зрения. Это значительно затрудняет исследование нативных препаратов.

В этих случаях надо готовить тонкие препараты или добавлять каплю слабого раствора уксусной кислоты (для гемолиза эритроцитов), но такой препарат в дальнейшем окрашивать нельзя.

При раневых гемотораксах представляет практический интерес изучение эритрограммы. Увеличение числа старых дегенеративных эритроцитов (микроформы, «тени» эритроцитов, пойкилоциты и др.) указывает на прекращение кровотечения: появление на их фоне свежих эритроцитов свидетельствует о повторном его возникновении.

Лейкоциты в небольшом количестве (до 15 в поле зрения) обнаруживаются в транссудатах и в большом количестве в жидкостях воспалительного происхождения (особенно много в гнойном экссудате). Качественный состав лейкоцитов (соотношение отдельных видов) изучают в окрашенных препаратах.

Клетки мезотелия распознают по большим размерам (25–40 мкм), округлой или полигональной форме. В транссудате большой давности эти клетки встречаются в виде скоплений, претерпевают дегенеративные изменения – вакуолизацию цитоплазмы и оттеснение ядра к периферии по типу перстневидных клеток. Они обнаруживаются в начальных стадиях воспалительного процесса, при реактивном воспалении плевры, а также при опухолях.

Опухолевые клетки можно заподозрить по расположению конгломератов, отсутствию четких клеточных структур, полиморфизму величины и формы. Они появляются при карциноме плевры.

Слизь обнаруживается крайне редко и является указанием на наличие бронхопульмонального свища.

Жировые капли в виде резко преломляющих свет круглых образований, окрашивающихся Суданом 3 в оранжевый цвет, встречаются в гнойных экссудатах с клеточным распадом и в больших количествах в хилезных экссудатах.

Кристаллы холестерина – это тонкие прозрачные пластинки с обрезанными углами. Обнаруживаются в старых осумкованных выпотах, чаще туберкулезной этиологии.

Друзы актиномицетов можно найти в плевральном экссудате при актиномикозе.

Окрашенные препараты.

Техника приготовления препаратов проста. Небольшую каплю осадка распределяют по предметному стеклу и высушивают на воздухе. Окраску производят после фиксации мазков обычными гематологическими методами, однако время окрашивания сокращается до 10 мин и меньше. Окрашенный препарат рассматривают сначала с сухой, а затем с иммерсионной системой, изучают морфологию клеточных элементов, подсчитывают соотношение отдельных видов. В окрашенных препаратах дифференцируются следующие клеточные элементы.

Нейтрофилы присутствуют в экссудатах любой этиологии. В серозных экссудатах туберкулезной этиологии они обнаруживаются в небольшом количестве в начальной стадии развития экссудата (примерно в течение первых 10 дней), а затем количество их постепенно уменьшается за счет лимфоцитов. Если нейтрофилез держится длительное время, это является признаком тяжелого течения заболевания; появление преобладающего количества нейтрофилов указывает на переход серозного экссудата в гнойный. В гнойных экссудатах нейтрофилы являются преобладающими клетками.

В более доброкачественных случаях (при серозно-гнойном характере жидкости) многие нейтрофилы сохранены, функционально активны, хорошо выполняют функцию фагоцитоза, в более тяжелых случаях (при отчетливо гнойном характере экссудата) обнаруживают признаки дегенерации: токсическую зернистость цитоплазмы, резкий пикноз ядра, кариолизис вплоть до полного клеточного распада. При благоприятном течении заболевания по мере просветления экссудата количество дегенеративных форм уменьшается, увеличивается число активных нейтрофилов, появляются различные тканевые клетки (макрофаги, мезотелиальные клетки и др.).

Лимфоциты являются обязательными элементами всякого экссудата. В серозных экссудатах в разгар клинических проявлений они превалируют в цитологической картине, составляя 80–90% всех лейкоцитов. Морфология лейкоцитов различна, наряду с малыми формами встречаются и более крупные клетки.

Эозинофилы содержатся иногда в серозных геморрагических экссудатах, при плевритах различной этиологии, в частности ревматических, иногда туберкулезных, опухолевых, а также в период рассасывания раневого плеврита, составляя 20–80% всех клеточных элементов.

Плазматические клетки могут встречаться в значительном количестве при затяжном характере воспаления серозных оболочек.

Полибласты – это тканевые клетки разнообразной величины и размера с базофильной цитоплазмой и нежным ядром овальной или бобовидной формы, иногда с наличием нуклеолы.

Макрофаги морфологически напоминают моноциты, имеют ядро неправильной причудливой формы с наличием нуклеолы и ячеистую, содержащую вакуоли и азурофильную зернистость цитоплазму. Появляются при кровоизлияниях в плевральную полость, опухолях.

Мезотелиальные клетки (покровный эпителий) имеют большой размер (25–30, нередко до 50 мкм), круглое, иногда содержащее нуклеолу ядро, расположенное центрально или эксцентрично, широкую нежно-голубую цитоплазму. Клетки мезотелия постоянно присутствуют в транссудатах, в начальных стадиях и в период репарации экссудатов, в значительном количестве при канцероматозе серозных оболочек. В жидкостях большой давности они подвергаются различной степени дегенерации, крупновакуолизированные клетки с оттесненным к периферии ядром напоминают раковые перстневидные клетки, что иногда приводит к ошибкам.

Клетки злокачественных опухолей обнаруживаются в полостных жидкостях при канцероматозе плевры, брюшины, вследствие первичного (мезотелиома) или вторичного (прорастание опухоли из соседних и метастазирование из удаленных органов, лимфогранулематоз) поражения. Клетки злокачественных опухолей в экссудате отличаются полиморфизмом, увеличением и гиперхромией ядра с множеством мелких нуклеол, базофилией вакуолизированной цитоплазмы, наличием митозов, фагоцитарной активностью.

Встречаются перстневидные клетки, в центре которых имеется огромная вакуоль. Цитологическая диагностика рака надежна только в случае, если обнаружены конгломераты подобных атипичных клеток. При люминесцентной микроскопии (акридин оранжевый, родамин) свечение опухолевых отличается от люминесценции мезотелиальных клеток.

Бактериоскопическое исследование.

Сухие фиксированные мазки окрашивают по Цилю—Нильсену, Граму и т. д. Для исследования на туберкулезные микобактерии экссудат подвергают длительному центрифугированию или обработке способом флотации. При необходимости производят бактериологическое исследование.

Дифференциальная диагностика полостных жидкостей.

Далее мы остановимся немного подробнее на основных заболеваниях, которые сопровождаются скоплением жидкостей в различных полостях человеческого организма.

Плевриты.

Синдром плеврального выпота диагностируется примерно у 10% больных пульмонологического профиля. Природа заболеваний, проявляющихся плевральным выпотом, весьма разнообразна. Это большая гетерогенная группа:

1) воспалительные, застойные, опухолевые, диспротеинемические выпоты;

2) плевральные выпоты вследствие нарушения целостности плевры;

3) выпоты при длительном контакте с асбестом, при уремии и пр.

Возникновение плеврального выпота всегда является признаком неблагоприятного (осложненного) течения основного заболевания и предполагает интенсификацию, а в ряде случаев и изменение стратегии лечения. Гетерогенность заболеваний, сопровождающихся (проявляющихся) плевральным выпотом, определяет важность дифференциальной диагностики плевральных выпотов. Целью дифференциальной диагностики плевральных выпотов является установление главной причины образования выпота в плевральной полости для подбора адекватной терапии.

При общеклиническом обследовании важно различать признаки основного заболевания и собственно поражения плевры. Основными клиническими признаками плеврального выпота являются боли в грудной клетке, непродуктивный кашель и одышка. Важный признак плеврального выпота – смещение средостения. При парапневмоническом плеврите средостение обычно смещается в здоровую сторону. При выпоте, сочетающемся с ателектазом или пневмоциррозом, средостение смещается в пораженную сторону. Дифференциально-диагностическое значение имеют не столько наличие или выраженность того или иного симптома плеврального выпота, сколько скорость нарастания симптоматики. Так, для воспалительных поражений плевры более характерно острое начало, а для опухолевых или застойных – медленное, постепенное нарастание симптоматики. Весьма существенным является сочетание признаков плеврального выпота с симптомами основного заболевания. На этапе клинического исследования врач определяет направленность, ширину и глубину диагностического поиска.

Плевральная пункция, входящая в обязательный диагностический минимум, дает много информации, позволяющей верифицировать диагноз. Первым и весьма важным элементом дифференциальной диагностики плеврального выпота является определение характера жидкости: экссудат или транссудат. При этом дифференциально-диагностическое значение имеет не только определение абсолютного содержания того или иного вещества в плевральном выпоте, но и соотношение содержания исследуемого компонента в выпоте и сыворотке крови. При обнаружении транссудата в плевральной полости дальнейший поиск причин поражения плевры прекращают и проводят соответствующие лечебные мероприятия (эвакуацию выпота, назначение мочегонных и прочих средств, уменьшающих транссудацию в плевральную полость).

При воспалительном характере плеврального выпота – экссудате – диагностический поиск продолжается. Определенное значение для диагностики имеет внешний вид плеврального содержимого. Так, геморрагический экссудат наблюдается при тромбоэмболии легочной артерии, травмах, опухолях, коричневый – при амебиазе, молочный – при хилотораксе. Повышенная вязкость характерна для мезотелиомы, гнилостный запах – для эмпиемы.

Анализ клеточного содержимого характеризует фазу и характер воспаления. Так, нейтрофилез экссудата свидетельствует об острой фазе воспаления или суперинфицировании. Лимфоцитоз характерен для хронического воспаления. Эозинофилия более 10% нередко встречается в экссудатах. Это может быть и признаком основного заболевания, и результатом аутосенсибилизации при повторных плевральных пункциях. Отсутствие мезотелия в экссудате наблюдается в тех случаях, когда плевральные листки покрыты фибрином (при туберкулезном и парапневмоническом плевритах). При застойных выпотах обычно наблюдается высокое содержание клеток мезотелия. Обнаружение опухолевых клеток, микроорганизмов, паразитов при микроскопии осадка плеврального выпота является абсолютным диагностическим признаком и означает окончательную верификацию диагноза.

Все воспалительные плевриты можно условно разделить на следующие группы:

1) гнойно-воспалительные;

2) инфекционные:

– бактериальные;

– грибковые;

– вирусные и др.;

3) паразитарные:

–амебиаз;

– эхинококкоз;

– парагонизм и др.;

4) ферментогенные: панкреатогенный;

5) аллергические и аутоиммунные:

– экзогенный аллергический альвеолит;

– лекарственная аллергия;

– синдром Дресслера и др.;

6) при ревматических заболеваниях:

– системная красная волчанка;

– ревматоидный артрит;

– ревматизм и др.;

7) травматические:

– лучевая терапия;

– ожоги и др.

Весьма полезным в дифференциальной диагностике плевритов является исследование глюкозы плеврального содержимого. Низкое содержание (менее 3,33 ммоль/л) характерно для туберкулеза, опухолевого поражения, ревматического и парапневмонического плеврита. При других вариантах плевритов содержание глюкозы в экссудате обычно равно таковому в сыворотке крови. При уровне глюкозы менее 2,22 ммоль/л у больных с парапневмоническим плевритом весьма высока вероятность формирования эмпиемы, а при эмпиеме глюкоза в плевральном содержимом обычно отсутствует. Интенсивность воспаления в плевральной полости обычно коррелирует с повышением лактатдегидрогеназы (ЛДГ). Наряду с ЛДГ по специальным показаниям в экссудате можно определять и другие маркеры воспаления: металлопротеазы, интерлейкины. Иммунологическое исследование плеврального содержимого направлено на обнаружение либо этиологически значимых агентов (антигенов), либо следов их пребывания (антител). Для этой цели используются иммуноферментный анализ и полимеразная цепная реакция. Бактериологическое исследование плеврального содержимого дает максимальную информацию при инфекционной природе плевритов.

На первом этапе дифференциальной диагностики необходимо различать воспалительный, опухолевый и застойный характер выпота (табл. 52). На этом этапе наиболее сложным и ответственным является исключение (или подтверждение) опухолевой природы плеврального выпота. В большинстве случаев при опухолях наблюдаются постепенное развитие выпота и наличие известных факторов риска опухоли. Лучевые методы позволяют обнаружить дополнительные тени и определить показания к бронхологическому исследованию. Плевральное содержимое довольно часто носит геморрагический характер, в нем определяются опухолевые маркеры. Обнаружение опухолевых клеток является абсолютным диагностическим признаком и означает успешное окончание диагностического поиска. При отсутствии клеток опухоли в плевральном содержимом и сохраняющемся подозрении на опухолевый процесс показана торакоскопия с биопсией, позволяющая в большинстве случаев получить диагностически значимый материал.

Таблица 52.

Основные отличительные черты воспалительных, опухолевых и застойных выпотов.

Примечание.

ТЭЛА – тромбоэмболия легочной артерии.

Среди инфекционных плевритов наиболее часто приходится проводить дифференциальную диагностику между туберкулезным, пневмоническим и грибковым поражениями плевры.

Туберкулезный плеврит редко встречается как единственное проявление туберкулеза. Чаще он сочетается с диссеминированным, очаговым, инфильтративным туберкулезом легких, бронхоаденитом или первичным комплексом. Туберкулезный плеврит может быть первым проявлением первичного туберкулеза. В 3% случаев туберкулезный плеврит является случайной находкой. Выделяют 3 основных варианта туберкулезного плеврита: аллергический, перифокальный и туберкулез плевры.

Для аллергического плеврита характерно острое начало с болями и лихорадкой, с быстрой (в течение месяца) положительной динамикой процесса. Аллергический плеврит возникает у больных первичным туберкулезом при свежем заражении или хроническом течении первичной туберкулезной инфекции. Для этих больных характерна пышная туберкулиновая реакция, часто наблюдается эозинофилия. Экссудат чаще лимфоцитарный, иногда с примесью эозинофилов. Микобактерии в экссудате обычно не обнаруживаются. Нередко экссудативному плевриту у этих больных сопутствуют и другие проявления первичного туберкулеза: фликтены, узловатая эритема, полиартрит.

Перифокальный плеврит – это следствие вовлечения в воспалительный процесс плевральных листков у больных легочными формами туберкулеза. Течение такого плеврита длительное, может носить рецидивирующий характер. Рентгенологическое исследование грудной клетки у этих больных выявляет одну из форм туберкулезного поражения легких (очаговое, инфильтративное или кавернозное). Экссудат в большинстве случаев серозный, лимфоцитарный, микобактерии, как правило, не выявляются.

Туберкулез плевры может быть единственным проявлением заболевания, но возможно его сочетание с другими локализациями туберкулезного поражения. Морфологический субстрат туберкулеза плевры представлен более или менее крупными туберкулезными очагами с элементами казеозного некроза. Наряду с этим в плевре выражена экссудативная реакция, обусловливающая накопление выпота. В зависимости от размеров очагов и распространенности поражения экссудат может быть и серозным, и гнойным с преобладанием нейтрофилов. В экссудате нередко обнаруживаются микобактерии туберкулеза. Особое место среди плевритов туберкулезной природы занимает эмпиема плевры, развивающаяся при блокаде естественных механизмов резорбции экссудата. При всех вариантах туберкулезного плеврита большое значение имеют обнаружение микобактерий, их антигенов или антител к ним в экссудате, обнаружение внеплевральных форм туберкулеза, получение специфических результатов биопсии плевры.

Известно, что около 40% пневмоний протекают с более или менее выраженным плевритом. При этом в зависимости от этиологии пневмонии частота возникновения плеврита варьирует от 10% (Klebsiella pneumoniae) до 70–95% (Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus). При нижнедолевых пневмониях плевральный выпот обычно не диагностируется. Диагностическое значение имеет обнаружение пневмонического фокуса в паренхиме легкого. В плевральном содержимом возможно бактериологическое обнаружение возбудителя. При этом чаще положительные результаты культуральных исследований получаются при анаэробной флоре (до 70%) и реже – при пневмококковой инфекции (4%). Существенный вклад в диагностику этиологии плеврита вносят определение антигенов микроорганизмов и антител к ним в экссудате, а также быстрый ответ на адекватную антибактериальную терапию.

Плевриты грибковой природы возникают преимущественно у лиц с признаками недостаточности иммунитета. К группе риска относятся лица, длительно получающие иммунодепрессанты, кортикостероиды, после трансплантации внутренних органов, а также с хроническими заболеваниями, ведущими к снижению противогрибкового иммунитета (сахарным диабетом, ВИЧ-инфицированные и др.). Течение заболевания имеет много общего с туберкулезом. Обычно микотический плеврит сочетается с грибковым поражением паренхимы легких. Решающее значение в диагностике имеет обнаружение грибов в повторных культуральных исследованиях плеврального содержимого. При наличии свищей (актиномикозе) культуральное исследование отделяемого позволяет верифицировать диагноз. Серодиагностика имеет вспомогательное значение.

Этиологическая структура паразитарных поражений плевры определяется эпидемиологическими особенностями паразитарных болезней. В России наиболее часто наблюдаются плевриты при амебиазе, эхинококкозе, парагонимозе. Основные дифференциально-диагностические признаки этих болезней следующие.

Амебный плеврит возникает обычно при прорыве через диафрагму амебного абсцесса печени. Это сопровождается резкой болью в правом подреберье, одышкой. Плевральный выпот имеет вид шоколадного сиропа, содержит частицы паренхимы печени, нейтрофилы. Амебы определяются лишь в 10% случаев. Серодиагностика обычно помогает уточнить этиологический диагноз.

Эхинококковые поражения плевры возникают при прорыве эхинококковой кисты легкого, печени или селезенки в плевральную полость. Реже киста развивается первично в плевральной полости. При прорыве кисты в плевральную полость возникают острая боль, одышка. Нередко прорыв нагноившейся кисты ведет к формированию эмпиемы. Наличие субплеврально расположенной эхинококковой кисты часто ведет к образованию бронхоплеврального свища. Диагностическое значение имеют обнаружение в экссудате, биоптате плевры сколексов с крючьями паразита, оболочек эхинококковой кисты, а также положительные результаты серодиагностики.

Экссудативный плеврит – типичное проявление парагонимоза. В России эндемичные очаги этой инфекции расположены на Дальнем Востоке. У 40% больных парагонимозом диагностируется сухой мигрирующий рецидивирующий плеврит. У трети больных парагонимозом экссудативный плеврит сочетается с очаговыми и инфильтративными поражениями легких. Для этих плевритов характерно длительное течение с образованием мощных плевральных сращений. Экссудат преимущественно эозинофильный. Диагностика основана на обнаружении в плевральной жидкости и мокроте яиц паразита и на повышении титров антител к антигенам паразита.

Экссудативные плевриты – нередкое проявление системных заболеваний соединительной ткани. Системная красная волчанка (СКВ) до 50% случаев протекает с поражением плевры. Плевральный выпот у таких больных чаще двусторонний, экссудат серозный, лимфоцитарный. Обнаружение клинико-лабораторных признаков СКВ, особенно противоядерных антител и LE-клеток, позволяет установить природу плеврита. Особенностью волчаночного плеврита является высокая эффективность кортикостероидной терапии.

Экссудативный плеврит при ревматоидном полиартрите имеет склонность к хроническому рецидивирующему течению. Экссудат серозный, лимфоцитарный, с низким содержанием глюкозы и высокими титрами ревматоидного фактора. Эффективность применения кортикостероидов непостоянная. В диагностике важен учет других проявлений ревматоидного полиартрита. Экссудативный плеврит при ревматизме имеет минимальное количество специфических признаков. Диагностика основана на учете клиники ревматизма и исключении других возможных причин плеврита. При гистологическом исследовании биоптатов плевры специфические гранулемы обнаруживаются очень редко.

Таким образом, дифференциальная диагностика плевральных выпотов должна осуществляться последовательно, с учетом клинических, лабораторных и инструментальных данных до получения абсолютных диагностических признаков заболевания. Важными элементами диагностики являются выявление и идентификация внеплевральных признаков заболевания, приведшего к появлению плеврального выпота.

Несмотря на большую дополнительную информацию, получаемую при исследовании плеврального содержимого и биоптатов плевры, не всегда удается получить абсолютные диагностические признаки. При отсутствии абсолютных диагностических признаков нозологической принадлежности плеврита (микрофлора, специфические гранулемы или опухолевые клетки) диагноз устанавливается по сумме косвенных признаков, в том числе и по эффективности пробной терапии.

Перитонит.

Скопление жидкости возможно и в полости брюшины.

Перитонит – это воспаление брюшины.

Классификация перитонитов.

1. По происхождению:

– вторичный перитонит: как следствие острого хирургического заболевания; как следствие перфорации полого органа;

– послеоперационный перитонит вследствие несостоятельности швов полых органов; вследствие прогрессирования воспалительного процесса;

– криптогенный перитонит, когда источник перитонита не выявлен.

2. По характеру экссудата:

– серозный перитонит;

– геморрагический перитонит;

– фибринозный перитонит;

– гнойный перитонит;

– гнилостный перитонит;

– каловый перитонит;

– желчный перитонит;

– мочевой перитонит.

3. По распространенности процесса:

– местный перитонит: занимает 1–2 смежные анатомические области (неотграниченный); отграниченный (инфильтрат или абсцесс брюшной полости);

– диффузный перитонит: занимает 2–3 смежные анатомические области;

– разлитой перитонит: занимает не менее трех анатомических областей до 2/3 брюшины, или один из этажей брюшной полости;

– общий перитонит (воспаление всей брюшины).

4. По стадиям развития:

– реактивная фаза;

– токсическая фаза;

– терминальная фаза.

Клиническая картина перитонита наслаивается на проявления основного заболевания (острый аппендицит, острый холецистит и т. д.). Характеризуется нарастающими болями в животе, симптомами интоксикации, тошнотой и рвотой, вздутием живота, гипертермией. При обследовании больного выявляются сухой язык, тахикардия, живот при пальпации напряжен (доскообразный живот) и болезнен, определяются симптомы раздражения брюшины (симптом Щеткина—Блюмберга, симптом Раздольского). В поздние стадии присоединяются парез и паралич желудочно-кишечного тракта, в анализах крови отмечаются лейкоцитоз, сдвиг лейкоцитарной формулы влево, токсическая зернистость нейтрофилов, увеличивается лейкоцитарный индекс интоксикации, повышается СОЭ.

Лечение.

Лечение перитонита только оперативное, которое состоит из трех основных этапов:

1) ликвидации источника перитонита: аппендэктомия, холецистэктомия, ушивание перфоративного отверстия и т. д.;

2) санации брюшной полости, которая состоит в эвакуации экссудата, при разлитом и общем перитонитах необходимо промывание брюшной полости растворами антисептиков;

3) адекватного дренирования отлогих участков брюшной полости: подпеченочного и поддиафрагмального пространств, боковых каналов, полости малого таза.

После операции проводят инфузионную дезинтоксикационную терапию, антибактериальную терапию, стимуляцию моторики желудочно-кишечного тракта, стимуляцию защитных сил организма, парентеральное питание.

Перикардит.

Перикардит – это воспаление сердечной сумки, сопровождаемое выпотом (серозным, фибринозным, гнойным, геморрагическим); наблюдается как сопутствующее явление при остром суставном ревматизме, скарлатине, кори, септицемии, цинге, левостороннем плеврите, пневмонии, страданиях клапанов, бугорчатке. Симптомы: боль в области сердца, лихорадка, цианотический вид, одышка, учащенный пульс, шум. Часто перикардит заканчивается смертью.

Возбудители инфекционных перикардитов у человека – кокки, вирусы, микобактерии туберкулеза и др. В их развитии играет роль сенсибилизация перикарда продуктами белкового распада тканей и бактериальными токсинами; такой аллергический механизм может играть и самостоятельную патогенетическую роль. Чаще других встречается ревматический перикардит. К неинфекционным относят перикардит при уремии, инфаркте миокарда, травматический, послеоперационный и др. Кроме того, выделяют идиопатический доброкачественный перикардит, причины которого еще не ясны. Фибринозный перикардит связан с отложением на листках перикарда сухого налета (фибрина). Такое явление наблюдается при туберкулезе, уремии, инфаркте миокарда и других заболеваниях. Экссудативный перикардит, при котором щель между листками перикарда заполняется выпотом (экссудатом), может быть серозным или серозно-фибринозным (туберкулезный, ревматический, идиопатический и др.), геморрагическим (туберкулезный, при опухолях и др.), гнойным и гнилостным (при абсцессе легкого и др.). При экссудативном перикардите исходом заболевания могут быть полное рассасывание выпота или образование спаек и сращений листков перикарда. Лечение зависит от причины перикардита: противоревматическое, противотуберкулезное и др.; применяют антибиотики, противоаллергические, противовоспалительные, симптоматические средства, при необходимости удаляют экссудат с помощью пункции или хирургическим путем.

Классификация перикардитов.

По характеру экссудата:

1) серозный;

2) геморрагический;

3) слипчивый;

4) гнойный;

5) фибринозный перикардит (панцирное сердце).

Клиническая картина.

Ведущим проявлением перикардита является нарушение деятельности сердца, или сердечная недостаточность, проявляющаяся одышкой, синюшностью кожных покровов, сердцебиением, слабостью, утомляемостью, отеками на нижних конечностях.

При обследовании выявляется тахикардия, при аускультации – ослабление сердечных тонов, шум трения перикарда, при перкуссии – расширение границ сердца. При рентгенографии органов грудной клетки в двух проекциях отмечается шарообразная форма сердца.

Лечение.

В начальных стадиях проводят консервативное лечение. При скоплении экссудата производят пункцию полости перикарда, при фибринозно-гнойном перикардите выполняют торакотомию, перикардотомию с эвакуацией экссудата. После пункции или операции проводят антибактериальную, дезинтоксикационную, кардиогенную терапию.

Необходимо помнить о целесообразности определения в плевральной жидкости активности амилазы, так как плевральный выпот нередко связан с острым панкреатитом. В этом случае активность амилазы в плевральной жидкости выше в два и более раза, чем в сыворотке крови. Повышение содержания амилазы в плевральной жидкости может быть при перфорации пищевода, в этих случаях фермент поступает из слюнной железы с проглоченной слюной и попадает в плевральную полость уже через 2 ч после наступления перфорации. Поэтому при подозрении на перфорацию пищевода необходимо определить активность амилазы в плевральной жидкости. Установить источник происхождения амилазы в выпоте можно при определении активности общей и панкреатической амилазы.

Характеристика ферментативного экссудата при остром панкреатите.

Наличие ферментативного экссудата подтверждает острый панкреатит.

Общие признаки ферментативного экссудата:

1) высокая активность амилазы (в 2–3 раза выше амилазы крови);

2) слабощелочной характер (рН > 7,0);

3) высокая концентрация белка (более 20 г/л);

4) отсутствие фибрина;

5) стерильность.

При нетяжелом панкреатите ферментативный экссудат или отсутствует, или если имеется, то в небольшом количестве, как правило серозный.

Количество ферментативного экссудата и интенсивность его окраски (от слабо-розовой до черной) прямо пропорциональны тяжести острого панкреатита.

У больных тяжелым панкреатитом ферментативный экссудат (несколько капель в пробирку с кровью) вызывает гемолиз крови.

Гнойные экссудаты.

Одним из самых распространенных инфекционных процессов, наблюдающихся в настоящее время, является продукция гнойного (иногда серозно-гнойного) экссудата как результат бактериального инфицирования полости, ткани или органа тела. Такие инфекции могут проявляться в виде достаточно простых и безобидных папул или множества гнойных карманов в абсцессах в одном или нескольких анатомических участках.

Экссудат состоит из белых кровяных телец, преимущественно полиморфно-ядерных лейкоцитов, инородных организмов (микробов) и смеси транссудата с фибрином. В одних случаях экссудат может накапливаться в межклеточном пространстве в пределах ткани, например фурункул или подкожный нарыв, в то время как в других случаях экссудат образуется в связи с открытыми ранами, из которых вытекают мутная жидкость или гной.

Как анатомические участки, вовлеченные в экссудативные процессы, так и микроорганизмы, вызывающие эти процессы, могут быть весьма разнообразными.

Согласно рекомендациям ВОЗ, все наиболее часто встречающиеся бактериальные патогены разделены по уровням приоритетности.

1. Патогены высокого уровня приоритетности:

– пиогенный стрептококк;

– золотистый стафилококк.

2. Патогены среднего уровня приоритетности:

– энтеробактерии;

– псевдомонады и другие неферментирующие грамотрицательные бактерии;

– клостридии;

– бактероиды и другие анаэробы;

– стрептококки (других видов).

3. Патогены низкого уровня приоритетности:

– Bacillus anthracis;

– Mycobacterium tuberculosis, Mulcerans и др.;

– Pasteurella multocida.

Возбудители вирусных инфекций в отличие от грибов и бактерий очень редко являются продуцентами гнойного экссудата.

Взаимосвязь лечащего врача и врача-лаборанта особенно важна при постановке диагноза и выборе тактики лечения больного при наличии заболевания, сопровождающегося гнойной инфекцией. Врач-лаборант должен сотрудничать с клиницистом, чтобы обеспечить взятие материала по всем правилам и его незамедлительную доставку в лабораторию для безотлагательного проведения необходимых исследований.

Современный протокол микробиологического исследования клинического материала, полученного от пациентов с раневой инфекцией.

Хирургический материал может быть получен при пункции местных абсцессов или во время других хирургических процедур. Хирургу следует посоветовать отбирать несколько маленьких кусочков различных тканей и имеющиеся образцы гнойного экссудата. Если возможно, то не следует пользоваться ватным тампоном. Экссудат необходимо отбирать стерильным шприцем с иглой. Если использован ватный тампон, следует отбирать как можно больше экссудата и поместить тампон в соответствующую емкость для отправки в лабораторию. Некоторые примеры клинических состояний и обнаруживаемые при этом микроорганизмы в различных образцах хирургического материала приведены ниже.

Перитонеальная полость наиболее часто содержит грамотрицательные кишечные бактерии, грамотрицательные анаэробные палочки (Bacteroides fragilis) и клостридии.

Межклеточный абсцесс может содержать любые микроорганизмы как одного вида, так и смешанные: наиболее часто выделяются грамположительные кокки и грамотрицательные бактерии. Необходимо учитывать возможность присутствия анаэробных бактерий и амеб в зависимости от места расположения абсцессов.

Лимфатические узлы наиболее часто вовлекаются при системных инфекциях. Они увеличиваются в размерах и часто имеют тенденцию к аккумулированию гнойного экссудата. Если лимфатический узел флюктуирует, содержащаяся в нем жидкость может быть пунктирована лечащим врачом. Биоптат или пунктат лимфатического узла ребенка следует исследовать на наличие Mycobacterium tuberculosis или других микобактерий. Дополнительно материал исследуют на наличие стафилококков, стрептококков и грамотрицательных кишечных бактерий.

Кожные покровы и подкожная клетчатка являются локусами как для абсцессов, так и для раневых инфекций. Подкожные абсцессы, как правило, вызываются стафилококками. Открытые, поврежденные, мокнущие кожные покровы часто поражены β-гемолитическим стрептококком и (или) стафилококком, как при импетиго. Другие разновидности кожных поражений, требующие хирургического вмешательства, часто рассматриваемые как результат внутрибольничных инфекций, – это пролежни. Бактерии, являющиеся комменсалами кожи или представителями нормальной микрофлоры кишечника, обладают способностью к пролиферации на поверхности язвы, что вызывает ее неприятный запах и вид.

Ожоги склонны к инфицированию различными видами бактерий. Наиболее часто обнаруживаемыми бактериальными агентами являются стафилококки и синегнойная палочка.

Выпоты. Иногда серозная или гнойная жидкость собирается в полостях, в которых в норме содержится очень малый объем стерильной жидкости, например в перикардиальной сумке, плевральной полости, суставах или синовиальных сочленениях. Пунктирование полости иглой в асептических условиях позволяет взять для исследования материал, из которого может быть выделен и идентифицирован возбудитель. Обычно причиной появления выпотов являются бактерии, однако грибы и вирусы также могут быть ответственными за этот процесс. Такие инфекции, как правило, моноспецифичны, но могут встречаться и смешанные (аэробы и анаэробы) случаи. Пункция плевральной полости, например, может выявить пневмококки, зеленящие стрептококки, гемофильные палочки, анаэробные стрептококки и бактероиды.

Взятие и транспортировка материала.

Взятие материала требует тесного сотрудничества лаборатории и клинического отделения. Во множестве случаев это единственная возможность получить материал для исследования, поскольку во многих ситуациях «повторного» материала для исследования просто не будет. В связи с этим выполненное по всем правилам взятие материала, его транспортировка и хранение чрезвычайно важны, и каких-либо отступлений от принятой процедуры следует избегать.

Абсцессы. В случае обнаружения абсцесса хирургу или лечащему врачу следует проконсультироваться с бактериологом, чтобы определить дальнейшие действия. Техника забора гноя и кусочков ткани из абсцесса аналогична той, что применяется при хирургической операции. Максимально возможное количество гнойного материала следует забирать шприцем, взятый материал переносят в стерильную емкость в асептических условиях. В том случае, если стерильной емкости не оказалось, взятый материал может быть оставлен в шприце с закрытой иглой. В этом случае сам шприц доставляют в лабораторию.

Следует принять меры к недопущению забора малого количества материала с помощью тампона, когда в действительности имеется большой объем экссудата. Тампон в виде исключения может быть использован только для сбора гноя, когда имеется скудное его количество или когда гной отбирают из анатомической области, требующей обращения с особой осторожностью, например из глаза. Когда кусочки ткани из области абсцесса получены, их необходимо измельчить в маленьком объеме стерильного бульона, используя для этого стерильные ножницы.

Инфицированные рваные, проникающие ранения, послеоперационные раны, ожоги, пролежни. После тщательной обработки операционного поля хирург определяет места, где скапливается гной, расположены некротические ткани, выделяется газ (крепитация) или наблюдаются другие признаки инфекции. Частицы пораженных тканей, предназначенные для лабораторного исследования, помещают в стерильную марлю и затем в стерильную емкость. Гной или другой экссудат должны быть аккуратно собраны и помещены в стерильную пробирку. При необходимости могут быть использованы тампоны.

Свищи или отделяемое лимфатических узлов. В тех случаях, когда свищи или воспаленные лимфатические узлы самопроизвольно дренируются, этот материал должен быть тщательно собран с помощью стерильной пастеровской пипетки с резиновой грушей и помещен в стерильную пробирку. Если самопроизвольного дренирования не произошло, хирургу следует получить материал, используя стерильный шприц с иглой или зонд. Использования тампона по возможности следует избегать.

Выпоты. Большой объем скопившейся жидкости в полостях тела, таких как плевральная полость, брюшная полость, коленный сустав, требует вмешательства хирурга, который в асептических условиях производит прокол, собирает жидкость в стерильную емкость и организует ее быструю доставку в лабораторию для микробиологического и цитологического исследований. В тех случаях, когда продукция экссудата постоянно продолжается и поставлен открытый дренаж, необходимо собрать дренажную жидкость в асептических условиях в стерильную пробирку и отправить ее в лабораторию.

Макроскопическое исследование.

Провести оценку образцов гноя или отделяемого ран, отобранных с помощью тампона, очень трудно, особенно когда тампоны были помещены в транспортную среду. Если же образцы гноя получены в стерильной емкости или шприце, бактериологу следует внимательно исследовать их для выявления особенностей цвета, консистенции и запаха.

Цвет. Цветовая гамма гноя может варьировать от желто-зеленого до красно-коричневого. Красный цвет обычно является следствием наличия в нем крови или гемоглобина. Пунктат из первичного амебиазного печеночного абсцесса имеет светло-коричневый или темно-коричневый цвет и желатинообразную консистенцию. Гной из послеоперационных или травматических ран (ожогов) может быть окрашен в зелено-голубой цвет за счет пигмента пиоцианина, вырабатываемого синегнойной палочкой.

Консистенция. Консистенция гноя может варьировать от очень жидкой до очень густой и клейкой. Экссудаты, полученные из суставов, плевральной полости, перикардиального мешка или брюшины, обычно жидкие с возможной градацией от серозных до гнойных.

Гной, полученный из дренажа свищей шейной области, необходимо исследовать на наличие маленьких желтых гранул «серы», которые являются колониями Actinomyces israelii. Наличие серых гранул позволяет поставить предположительный диагноз шейно-лицевого актиномикоза. Мелкие гранулы различного цвета (белого, черного, красного или коричневого) типичны для мицетомы – гранулематозной опухоли, которая обычно поражает нижние конечности (так называемая мадурская стопа) и характеризуется множественными абсцессами и самодренирующимися свищами. Цвет гранул определяется наличием в них «волокнистых» бактерий или мицелиальных грибов. Гной из туберкулезного «холодного абсцесса» (с наличием нескольких характерных признаков воспаления) иногда сравнивают с мягким сыром и называют «казеиновым гноем».

Запах. Отвратительный фекальный запах – один из главных характерных признаков анаэробной или смешанной инфекции. О характерном запахе вместе с результатами микроскопии мазка, окрашенного по Граму, бактериолог должен сразу же сообщить лечащему врачу, поскольку это может повлиять на выбор схемы эмпирической антибактериальной терапии.

Микроскопическое исследование.

Каждый образец следует окрашивать по Граму и подвергать микроскопии.

Прямая микроскопия. По требованию лечащего врача или когда имеются основания предполагать наличие грибковой или паразитарной инфекции, следует проводить микроскопию нативного материала. Когда исследуют гной на наличие грибов, его смешивают с каплей 10%-ной гидроокиси калия.

Сверху материал покрывают покровным стеклом и, используя объектив 10° и 40°, внимательно исследуют на наличие:

1) активно движущихся амеб в пунктате из печеночного абсцесса;

2) дрожжевых клеток Histoplasma capsulatum, var. Duboisii, Blastomyces dermatidis, Candida spp.;

3) грибковых гифов и бактериальных нитей в раздавленных гранулах мицетомы;

4) паразитов, таких как микрофилярии, крючья Echinococcus, яйца Schistosoma, Fasciola и Paragonimus.

Окраска по Граму. Приготовленный мазок микроскопируют в иммерсионном масле, используя объектив 100°. Внимательно просматривают мазок, отмечая наличие и количество (+) следующих клеток:

1) полиморфно-ядерные гранулоциты (клетки гноя);

2) грамположительные кокки, расположенные в виде виноградной грозди (предположительно стафилококки);

3) грамположительные кокки, расположенные в виде цепочек (предположительно стрептококки);

4) грамотрицательные палочки, сходные с колиформами или облигатными анаэробами (бактероиды);

5) крупные прямые грамположительные палочки с «обрубленными» концами – предположительно клостридии или бациллы;

6) разнообразные бактериальные клетки, включая веретенообразные формы палочек. Такая картина свидетельствует о смешанной анаэробной флоре.

Candida или другие дрожжевые клетки, которые выглядят как овальные грамположительные почкующиеся сферы, часто формируют дочерний псевдомицелий.

Серные гранулы актиномицетов или гранулы мицетомы должны быть раздавлены на стекле, окрашены по Граму и исследованы на наличие тонких фрагментарных грамположительных волокон.

Бактериологическое исследование.

Посев. В том случае, когда при микроскопическом исследовании обнаружены бактерии или грибы, материал следует засеять на соответствующие питательные среды. Независимо от результатов микроскопического исследования все пробы гноя или экссудата следует посеять как минимум на 3 питательные среды:

1) кровяной агар для выделения стрептококков и стафилококков;

2) агар Мак-Конки для выделения грамотрицательных палочек;

3) бульон, который может служить средой обогащения как для аэробов, так и для анаэробов, например тиогликолевый бульон.

Другие питательные среды следует использовать исходя из результатов микроскопического исследования и нозологической формы инфекции, например в случаях, перечисленных ниже.

При подозрении на наличие стафилококков целесообразно использовать желточно-солевой (магнитно-солевой) агар для получения роста чистой культуры и для предварительной дифференциации между золотистым и другими стафилококками.

При подозрении на наличие стрептококков их идентификацию можно ускорить, положив дифференцирующий диск с бацитрацином на чашку с первичным посевом (кровяная среда).

При подозрении на грибы материал следует засеять в 2 пробирки с агаром Сабуро. Одну из них инкубируют при +35–37°С, другую – при комнатной температуре.

Гной у больных с артритами, плевритами, остеомиелитами, воспалением подкожной клетчатки, особенно полученный от детей в возрасте до 5 лет, следует высевать на шоколадный агар для выявления гемофильной палочки.

Культивирование в строго анаэробных условиях необходимо осуществлять, если в окрашенном по Граму материале обнаружена «смешанная анаэробная флора», а также когда этот материал имеет типичный неприятный запах. Анаэробный кровяной агар также необходим для роста Actimomyces spp. Анаэробное культивирование потребуется, если лечащий врач подозревает газовую гангрену (клостридии).

Оценка результатов. Выделенные микроорганизмы являются этиологическим агентом воспалительного процесса. При выделении ассоциации микроорганизмов из раневого отделяемого и выпотной жидкости ведущее значение в течении гнойно-воспалительного процесса следует отдавать видам, количественно преобладающим в данной ассоциации.

В лаборатории должен быть произведен подсчет степени обсемененности исследуемого материала. Имеются следующие критерии количественной оценки микробного роста при прямом штриховом посеве раневого отделяемого на 1/2 чашки Петри с плотной питательной средой:

1) степень 1 – очень скудный рост (на плотных питательных средах роста нет, рост только в бульоне);

2) степень 2 – небольшое количество – 10 колоний;

3) степень 3 – умеренное количество – от 11 до 100 колоний;

4) степень 4 – большое количество – более 100 колоний.

Показано, что уровень обсемененности тканей в ране, равный 105 и выше колониеобразующих единиц (КОЕ) на грамм содержимого, является критическим. Превышение этого уровня указывает на возможность генерализации инфекционного процесса. Аналогичного критерия для выпотов пока не найдено.

Определение чувствительности к антибиотикам. Колонии, выросшие на плотной питательной среде, идентифицируют и определяют чувствительность чистой культуры микроорганизма к антибиотикам. Используют или стандартный диско-диффузионный метод, предложенный Керби и Бауэром (метод Керби—Бауэра), или метод серийных разведений – коммерческие тест-системы («стрипы»), представляющие собой набор тех или иных антибиотиков, представленных в двух концентрациях. Этот метод (breakpoint) позволяет избежать трудоемкости стандартного метода серийных разведений, но не теряет при этом его главного достоинства – количественного определения минимальной подавляющей концентрации препарата, соответствующей терапевтической концентрации антибиотика в организме.