Глава 13. Исследование костного мозга.

Развитие, строение, кровоснабжение и иннервация костного мозга.

Красный костный мозг является центральным органом гемопоэза и иммуногенеза. В нем находится основная часть стволовых кроветворных клеток, происходит развитие клеток лимфоидного и миелоидного рядов. В красном костном мозге осуществляется универсальное кроветворение, т. е. все виды миелоидного кроветворения, начальные этапы лимфоидного кроветворения и, возможно, антигеннезависимая дифференцировка В-лимфоцитов. На этом основании красный костный мозг можно отнести к органам иммунологической защиты.

Развитие. Красный костный мозг развивается из мезенхимы, причем ретикулярная строма красного костного мозга развивается из мезенхимы тела зародыша, а стволовые кроветворные клетки развиваются из внезародышевой мезенхимы желточного мешка и уже затем заселяют ретикулярную строму. В эмбриогенезе красный костный мозг появляется на 2-м месяце в плоских костях и позвонках, на 4-м месяце – в трубчатых костях. У взрослых он находится в эпифизах трубчатых костей, губчатом веществе плоских костей. Несмотря на территориальную разобщенность, функционально костный мозг связан в единый орган благодаря миграции клеток и регуляторным механизмам. Масса красного костного мозга составляет 1,3–3,7 кг (3–6% массы тела).

Строение. Строма красного костного мозга представлена костными балками и ретикулярной тканью. В ретикулярной ткани содержится множество кровеносных сосудов, в основном синусоидных капилляров, не имеющих базальной мембраны, но содержащих поры в эндотелии.

В петлях ретикулярной ткани находятся гемопоэтические клетки на разных стадиях дифференцировки – от стволовой до зрелых (паренхима органа). Количество стволовых клеток в красном костном мозге наибольшее (5 × 106). Развивающиеся клетки лежат островками, которые представлены дифферонами различных клеток крови.

Кроветворная ткань красного костного мозга пронизана синусоидами перфорированного типа. Между синусоидами в виде тяжей располагается ретикулярная строма, в петлях которой находятся гемопоэтические клетки. Отмечается определенная локализация разных видов кроветворения в пределах тяжей: мегакариобласты и мегакариоциты (тромбоцитопоэз) располагаются по периферии тяжей вблизи синусоид, гранулоцитопоэз осуществляется в центре тяжей. Наиболее интенсивно кроветворение протекает вблизи эндоста. По мере созревания зрелые форменные элементы крови проникают в синусоиды через поры базальной мембраны и щели между эндотелиальными клетками.

Эритробластические островки обычно формируются вокруг макрофага, который называется клеткой-кормилкой (кормилицей). Клетка-кормилка захватывает железо, попадающее в кровь из погибших в селезенке старых эритроцитов, и отдает его образующимся эритроцитам для синтеза гемоглобина.

Созревающие гранулоциты формируют гранулобластические островки. Клетки тромбоцитарного ряда (мегакариобласты, про– и мегакариоциты) лежат рядом с синусоидными капиллярами. Как отмечалось выше, отростки мегакариоцитов проникают в капилляр, от них постоянно отделяются тромбоциты. Вокруг кровеносных сосудов встречаются небольшие группы лимфоцитов и моноцитов.

Среди клеток костного мозга преобладают зрелые и заканчивающие дифференцировку клетки (депонирующая функция красного костного мозга). Они при необходимости поступают в кровь.

В норме в кровь поступают только зрелые клетки. Предполагают, что при этом в их цитолемме появляются ферменты, разрушающие основное вещество вокруг капилляров, что облегчает выход клеток в кровь. Незрелые клетки таких ферментов не имеют. Второй возможный механизм селекции зрелых клеток – появление у них специфических рецепторов, взаимодействующих с эндотелием капилляров. При отсутствии таких рецепторов взаимодействие с эндотелием и выход клеток в кровоток невозможны.

Наряду с красным существует желтый (жировой) костный мозг. Он обычно находится в диафизах трубчатых костей. Состоит из ретикулярной ткани, которая местами заменена на жировую. Кроветворные клетки отсутствуют. Желтый костный мозг представляет собой своеобразный резерв для красного костного мозга. При кровопотерях в него заселяются гемопоэтические элементы, и он превращается в красный костный мозг. Таким образом, желтый и красный костный мозг можно рассматривать как 2 функциональных состояния одного кроветворного органа.

Кровоснабжение. Красный костный мозг снабжается кровью из двух источников:

1) питающими артериями, которые проходят через компактное вещество кости и распадаются на капилляры в самом костном мозге;

2) прободающими артериями, которые отходят от надкостницы, распадаются на артериолы и капилляры, проходящие в каналах остеонов, а затем впадают в синусы красного костного мозга.

Следовательно, красный костный мозг частично снабжается кровью, контактировавшей с костной тканью и обогащенной факторами, стимулирующими гемопоэз.

Артерии проникают в костномозговую полость и делятся на 2 ветви: дистальную и проксимальную. Эти ветви спирально закручены вокруг центральной вены костного мозга. Артерии разделяются на артериолы, отличающиеся небольшим диаметром (до 10 мкм). Для них характерно отсутствие прекапиллярных сфинктеров. Капилляры костного мозга делятся на истинные капилляры, возникающие в результате дихотомического деления артериол, и синусоидные капилляры, продолжающие истинные капилляры. В синусоидные капилляры переходит только часть истинных капилляров, тогда как другая их часть входит в гаверсовы каналы кости и далее, сливаясь, дает последовательно венулы и вены. Истинные капилляры костного мозга мало отличаются от капилляров других органов. Они имеют сплошной эндотелиальный слой, базальную мембрану и перициты. Эти капилляры выполняют трофическую функцию.

Синусоидные капилляры большей частью лежат вблизи эндоста кости и выполняют функцию селекции зрелых клеток крови и выделения их в кровоток, а также участвуют в заключительных этапах созревания клеток крови, осуществляя воздействие на них через молекулы клеточной адгезии. Диаметр синусоидных капилляров составляет от 100 до 500 мкм.

На срезах синусоидные капилляры могут иметь веретеновидную, овальную или гексагональную форму, выстланы эндотелием с выраженной фагоцитарной активностью. В эндотелии имеются фенестры, которые при функциональной нагрузке легко переходят в истинные поры. Базальная мембрана или отсутствует, или прерывиста. С эндотелием тесно связаны многочисленные макрофаги. Синусоиды продолжаются в венулы, а те, в свою очередь, вливаются в центральную вену безмышечного типа. Характерно наличие артериоло-венулярных анастомозов, по которым может сбрасываться кровь из артериол в венулы, минуя синусоидные и истинные капилляры. Анастомозы являются важным фактором регуляции гемопоэза и гомеостаза кроветворной системы.

Иннервация. Афферентная иннервация красного костного мозга осуществляется миелиновыми нервными волокнами, образованными дендритами псевдоуниполярных нейронов спинальных ганглиев соответствующих сегментов, а также черепно-мозговыми нервами, за исключением 1, 2 и 8-й пар.

Эфферентная иннервация обеспечивается симпатической нервной системой. Симпатические постганглионарные нервные волокна входят в костный мозг вместе с кровеносными сосудами, распределяясь в адвентиции артерий, артериол и в меньшей степени вен. Они также тесно связаны с истинными капиллярами и синусоидами. Факт непосредственного проникновения нервных волокон в ретикулярную ткань поддерживается не всеми исследователями, однако в последнее время доказано наличие нервных волокон между гемопоэтическими клетками, с которыми они образуют так называемые открытые синапсы. В таких синапсах нейромедиаторы из нервной терминали свободно изливаются в интерстиций, а затем, мигрируя к клеткам, оказывают на них регуляторное влияние. Большинство постганглионарных нервных волокон адренергические, однако часть из них является холинергическими. Некоторые исследователи допускают возможность холинергической иннервации костного мозга за счет постганглионаров, происходящих из параоссальных нервных ганглиев.

Прямая нервная регуляция кроветворения до сих пор ставится под сомнение, несмотря на обнаружение открытых синапсов. Поэтому считается, что нервная система оказывает трофическое влияние на миелоидную и ретикулярную ткани, регулируя кровоснабжение костного мозга. Десимпатизация и смешанная денервация костного мозга ведут к деструкции сосудистой стенки и к нарушению гемопоэза. Стимуляция симпатического отдела вегетативной нервной системы приводит к усилению выброса из костного мозга в кровоток клеток крови.

Регуляция кроветворения. Молекулярно-генетические механизмы кроветворения в принципе те же, что и любой пролиферирующей системы. Их можно свести к следующим процессам: репликация ДНК, транскрипция, сплайсинг РНК (вырезание из первоначальной молекулы РНК интронных участков и сшивка оставшихся частей), процессинг РНК с образованием специфических информационных РНК, трансляция – синтез специфических белков.

Цитологические механизмы кроветворения заключаются в процессах деления клеток, их детерминации, дифференцировке, росте, запрограммированной гибели (апоптозе), межклеточных и межтканевых взаимодействиях с помощью молекул клеточной адгезии и др.

Существует несколько уровней регуляции кроветворения:

1) геномно-ядерный уровень. В ядре кроветворных клеток, в их геноме заложена программа развития, реализация которой приводит к образованию специфических клеток крови. К этому уровню в конечном итоге приложены все остальные регуляторные механизмы. Показано существование так называемых факторов транскрипции – связывающихся с ДНК белков различных семейств, функционирующих с ранних стадий развития и регулирующих экспрессию генов кроветворных клеток;

2) внутриклеточный уровень сводится к выработке в цитоплазме кроветворных клеток специальных триггерных белков, влияющих на геном этих клеток;

3) межклеточный уровень включает действие кейлонов, гемопоэтинов, интерлейкинов, вырабатываемых дифференцированными клетками крови или стромы и влияющих на дифференцировку стволовой кроветворной клетки;

4) организменный уровень заключается в регуляции кроветворения интегрирующими системами организма: нервной, эндокринной, иммунной, циркуляторной.

Следует подчеркнуть, что эти системы работают в тесном взаимодействии. Эндокринная регуляция проявляется в стимулирующем влиянии на гемопоэз анаболических гормонов (соматотропина, андрогенов, инсулина, других ростовых факторов). С другой стороны, глюкокортикоиды в больших дозах могут подавлять кроветворение, что используется в лечении злокачественных поражений кроветворной системы. Иммунная регуляция осуществляется на межклеточном уровне, проявляясь выработкой клеток иммунной системы (макрофагами, моноцитами, гранулоцитами, лимфоцитами и др.) медиаторов, гормонов иммунной системы, интерлейкинов, которые контролируют процессы пролиферации, дифференцировки и апоптоза кроветворных клеток.

Наряду с регуляторными факторами, вырабатывающимися в самом организме, на гемопоэз оказывает стимулирующее влияние целый ряд экзогенных факторов, поступающих с пищей. Это прежде всего витамины (В₁₂, фолиевая кислота, оротат калия), которые участвуют в биосинтезе белка, в том числе и в кроветворных клетках.

Методы исследования костного мозга.

Пункция костного мозга.

Наиболее полное представление о состоянии кроветворной системы дают изучение пунктата костного мозга (из грудины) и трепанобиопсия, которыми широко пользуются в гематологической клинике.

Пункцию грудины по методу Аринкина производят при помощи иглы Кассирского, которая удобна и безопасна, так как имеет предохранительный щиток. Щиток-ограничитель может быть установлен на требуемую глубину проникновения в зависимости от толщины кожи и подкожной клетчатки и предохраняет от прокола задней пластинки грудины. Костный мозг забирают шприцем емкостью 10–20 мл. Для обеспечения требуемого вакуума предварительно удостоверяются, что шприц не пропускает воздуха.

Производят прокол рукоятки или тела грудины на уровне 3–4-го ребра по средней линии. Передняя стенка тела грудины тоньше и имеет ровную или слегка вогнутую поверхность, наиболее удобную для пункции. Кроме того, эта область костного мозга содержит большее количество клеток. Во время пункции грудины больной лежит на спине.

У детей существует опасность прокола грудины ввиду ее меньшей плотности и индивидуальных различий в толщине кости.

Поэтому у детей, особенно у новорожденных и грудных, предпочтительно делать пункцию в верхней трети большеберцовой кости, с внутренней стороны дистального эпифиза бедренной кости или пяточной кости.

Пункцию подвздошной кости производят на 1–2 см кзади от передней верхней ости ее гребешка. Можно пунктировать ребра и остистые отростки позвонков (удобнее – 3–4-й поясничные позвонки).

Пункция остистых отростков. При пункции остистых отростков позвонков пациент занимает сидячее положение, наклонившись вперед. Место пункции дезинфицируют спиртом и йодной настойкой. Затем кожу, подкожную клетчатку и надкостницу при помощи тонкой иглы инфильтрируют 1–2%-ным раствором новокаина в количестве 2 мл. Для анестезии кожи можно применять хлорэтил. Пункцию производят и без обезболивания.

Шприц и пункционную иглу (игла Кассирского) стерилизуют сухим методом или кипячением и тщательно высушивают спиртом, а затем эфиром. Перед тем как сделать укол, при помощи винтовой нарезки предохранитель-ограничитель устанавливают на необходимую глубину прокола. Иглу направляют перпендикулярно к грудине по ее средней линии, быстрым движением прокалывают кожу и подкожно-жировой слой и проходят наружную пластинку грудины. В этот момент уменьшается сопротивление, и игла, как бы проваливаясь, входит в полость костного мозга. При этом она устанавливается вертикально и неподвижно.

Если игла не находится в неподвижном состоянии, то, не вынимая ее, отодвигают предохранитель несколько выше и вновь продвигают иглу в полость костного мозга.

Следует помнить, что при наличии рака, миеломной болезни, остеомиелита и других остеолитических процессов игла, попадая в очаг поражения, встречает меньшее сопротивление и плохо фиксируется в кости.

После того как игла войдет в полость костного мозга, вынимают мандрен и плотно насаживают шприц. Далее оттягивают поршень шприца и насасывают не более 0,5–1 мл костного мозга (при большем количестве пунктата в нем может содержаться больше периферической крови). Если не удается получить костный мозг, то, не вынимая иглы, снимают шприц, вставляют вновь мандрен и, не вынимая иглы, переводят ее в другое положение – выше, ниже или в стороны. Затем снова с помощью шприца насасывают немного пунктата. После взятия костного мозга иглу, не разъединяя со шприцем, извлекают из грудины, а место прокола закрывают стерильной наклейкой. Полученный материал переносят на часовое стекло, затем выбирают кусочки костного мозга и готовят из них тонкие мазки. Если пунктат содержит примесь крови, то последнюю удаляют с помощью фильтровальной бумаги или отсасывают пастеровской пипеткой. Если же получено большое количество жидкого костного мозга, то методом лейкоконцентрации отделяют клетки от плазмы и уже из осадка делают мазки. Очень большое практическое значение имеет правильное приготовление мазка из ткани костного мозга, иначе примесь периферической крови не даст точного представления о клеточном составе костного мозга. В хорошо приготовленном препарате клетки расположены густо, но отдельно, и их структура хорошо видна.

Рекомендуется делать как можно больше мазков, использовав для этого весь полученный материал костного мозга. Мазки необходимо готовить быстро, так как свертывание костного мозга наступает быстрее, чем периферической крови. При этом клетки повреждаются настолько, что их невозможно дифференцировать.

При гипопластических и апластических состояниях костного мозга мазки содержат небольшое количество клеток, а иногда они полностью отсутствуют. Вопрос о том, является ли это следствием патологических процессов или результатом неправильно проведенной пункции, можно решить при повторной пункции. Мазки пунктата фиксируют и окрашивают так же, как и мазки периферической крови.

Для замедления свертывания пунктата костного мозга, которое создает известные трудности при его исследовании, В. И. Каро рекомендует следующий простой прием: на часовое стекло, покрытое парафином, перед пункцией насыпают очень тонким слоем (припудривают) порошкообразный цитрат натрия. Полученный при пункции костный мозг сразу же помещают на часовое стекло поверх цитрата натрия, который, растворяясь в жидкой части пунктата, тормозит его свертывание. Мельчайшие кристаллики цитрата натрия не мешают приготовлению мазков, не деформируют клеток.

Трепанобиопсия подвздошной кости. Прижизненное изучение гистологических препаратов, полученных методом трепанобиопсии, становится необходимым в тех случаях, когда при пункции не удается получить достаточное количество костного мозга, подтверждающее тот или иной патологический процесс. Гистологический метод приобретает особо важное значение при таких заболеваниях, как лейкозы, эритремия, остеомиелосклероз, гипо– и апластические процессы и др.

Для прокола и извлечения кусочка костной ткани М. Г. Абрамов предложил пользоваться иглой-троакаром. Игла сконструирована по принципу стернальной иглы Кассирского. Толщина иглы-троакара – 3 мм, внутренний диаметр – 2 мм, длина – 6 см. Периферический конец иглы имеет подобие фрезы и спиралевидное очертание, благодаря чему игла приобретает способность при ее вращении срезать костную ткань. Составными частями иглы являются мандрен (стилет с заостренным концом) и рукоятка. В. А. Ершов, Н. А. Климков модернизировали иглу-троакар Абрамова, сделав ее более удобной в работе. Игла отличается от описанной выше тем, что мандрен ее ввинчивается в нижний конец рукоятки и при проколе кортикального слоя быстро извлекается из иглы без предварительной разборки, что ускоряет процесс трепанобиопсии.

Прокол производят в гребешок подвздошной кости, отступив 2–3 см кзади от ее передней верхней ости. Технически удобнее прокалывать левую подвздошную кость. Место прокола дезинфицируют спиртом и йодной настойкой. Предварительно иглу стерилизуют сухим методом или кипячением и высушивают спиртом и эфиром. На сухой игле при помощи винтовой нарезки устанавливают щиток-ограничитель на необходимую глубину прокола с учетом толщины подкожного жира. Перед введением иглы-троакара производят анестезию кожи, подкожной клетчатки и надкостницы 2%-ным раствором новокаина. Проникнув иглой-троакаром в мягкие ткани, нащупывают концом заостренного мандрена место кости, где должен быть произведен прокол. Иглу вводят в костную ткань под некоторым давлением вращательными движениями. При появлении ощущения прочной фиксации иглы мандрен извлекают. Разъединив мандрен и ручку, последнюю вновь навинчивают на иглу, зафиксированную в кости.

Производя вращательное движение по часовой стрелке, иглу без большого труда удается ввести в спонгиозное вещество костной ткани. После этого вращательным движением иглу извлекают. Цилиндрический столбик костной ткани, находящейся в игле, выталкивают мандреном из просвета иглы на предметное стекло, а оттуда переносят в банку с формалином и отправляют на гистологическое исследование. Из оставшегося на стекле, в игле и на мандрене костного мозга делают мазки. Чаще всего удается вырезать и извлечь кусочек костной ткани длиной от 6 до 10 мм, иногда больше.

Трепанат (спонгиозная костная ткань) у здоровых людей и у больных с гиперпластическими процессами богат костным мозгом. При тяжелых апластических процессах трепанат имеет желтый цвет, что обусловливается почти полным исчезновением костномозговых элементов и заменой их жировой тканью.

При всех формах остеомиелосклероза и миелофиброза извлеченный кусочек костной ткани выглядит нередко «сухим», и из него удается извлечь лишь очень небольшое количество костного мозга для приготовления мазков.

Исследование клеток.

Определение количества клеток в пунктате.

Пунктат костного мозга на часовом стекле осторожно растирают стеклянной палочкой и быстро насасывают в смеситель для эритроцитов, набирают 3–5%-ный раствор уксусной кислоты (разведение костного мозга можно также производить пробирочным методом по Николаеву). После этого поступают так же, как при подсчете лейкоцитов крови.

Общее количество ядерных элементов колеблется в больших пределах, по-видимому, вследствие неодинакового состава костномозговой ткани в различных участках и различной примеси периферической крови в пунктате. У здоровых людей количество костномозговых клеток составляет от 45 тыс. до 250 тыс. в 1 мкл.

Миелограмма представляет собой процентное отношение клеточных элементов в мазках, приготовленных из пунктатов костного мозга. Мазки пунктата костного мозга просматривают сначала с малым увеличением и отбирают те, которые содержат наибольшее количество клеток. При малом увеличении нужно тщательно просмотреть по возможности все мазки для выявления комплексов атипических клеток, клеток Березовского—Штернберга, клеток Пирогова—Лангханса и др. При этом же увеличении нужно обратить внимание на количество мегакариоцитов: есть ли они в мазках, много их или мало.

В тех случаях, когда в мазке не обнаруживают или находят единичные мегакариоциты, необходимо тщательно просмотреть конец мазка в «метелочке», где они иногда собираются в большом количестве. После тщательного просмотра мазков приступают к дифференциальному подсчету клеток костного мозга. Подсчитывают не менее 500 клеток и вычисляют процент каждого вида клеток.

Подсчет можно производить двумя способами:

1) метод Коста. Считают отдельно клетки лейкопоэза и эритропоэза. Сосчитывают 500 (или 1000) клеток лейкопоэза, а количество клеток красной крови вычисляют на 100 клеток лейкопоэза;

2) метод Аринкина. Считают подряд все клетки костного мозга и вычисляют процент каждого вида клеток.

При оценке пунктата костного мозга, кроме количества подсчитанных клеток, необходимо учитывать и соотношение между молодыми и более зрелыми формами нейтрофилов – так называемый костномозговой индекс созревания нейтрофилов. В норме этот индекс меньше 1 и равен 0,6–0,8.

При оценке миелограммы необходимо знать динамику периферической крови и состояние больного. Помимо количественных сдвигов клеток лейкопоэза и эритропоэза, надо учитывать степень их созревания. При увеличении эритробластических и лейкобластических элементов с задержкой их созревания в периферической крови может наблюдаться уменьшение количества лейкоцитов и эритроцитов. В других же случаях (например, при эритремии) в костном мозге отмечаются увеличенное количество нормобластов без нарушения их созревания и увеличение числа эритроцитов в крови.

При оценке пунктата костного мозга очень важно отношение количества элементов лейкопоэза к числу ядерных элементов эритробластического ряда. У здоровых людей это соотношение составляет 4 : 1 или 3 : 1.

Если количество костномозговых клеток увеличивается в основном за счет клеток эритропоэза, это указывает на гиперплазию последнего, и соотношение лейко / эритро уменьшается, достигая величины 1 : 1 и меньше. Такая картина наблюдается при различных формах малокровия (постгеморрагической, гемолитической и В₁₂-дефицитной анемиях).

При нелеченной анемии Аддисона—Бирмера количество клеток увеличивается преимущественно за счет мегалобластов, а в начале ремиссии – за счет эритронормобластов. При этом соотношение лейко / эритро достигает 1 : 8. При полной ремиссии оно приближается к норме.

При уменьшении количества клеток в костном мозге уменьшение соотношения лейко / эритро может быть и не связано с гиперплазией эритропоэза, а является следствием уменьшения образования клеток гранулопоэза. Такая картина встречается при агранулоцитозе.

При одновременном уменьшении числа клеток лейкопоэза и эритропоэза может сохраниться нормальное соотношение между ними, и в то же время оба указанных выше ростка будут подавлены.

Подобное состояние встречается при гипо– и апластических процессах.

Резкое увеличение количества костномозговых элементов с увеличением соотношения лейко / эритро свидетельствует о гиперплазии миелоидных элементов, встречается при лейкозах, инфекциях, интоксикациях и других состояниях.

Для количественной оценки мегакариоцитов используют следующие методы:

1) подсчет в камере;

2) подсчет в мазках: по полям зрения, по отношению к количеству всех ядерных клеток костного мозга.

Все эти методы не являются достаточно точными. Наиболее точное количественное представление дает подсчет их в срезах костного мозга, полученного при трепанобиопсии.

Подсчет в счетной камере. При разведении пунктата костного мозга уксусной кислотой (1 : 20) происходит гемолиз эритроцитов, позволяющий производить подсчет мегакариоцитов в счетной камере. Разведение пунктата костного мозга и методика подсчета аналогичны подсчету лейкоцитов в крови.

Подсчет производят на всей поверхности сетки, затем число сосчитанных мегакариоцитов умножают на разведение (20) и делят на объем камеры (3,2).

Мегакариоциты в камере видны в виде крупных клеток с полиморфным гиперсегментированным ядром и широкой зоной цитоплазмы. Недостаточная точность метода обусловлена тем, что в камере не распознаются мелкие формы (мегакариобласты, голые ядра и др.), которые не попадают в счет. Преимущество метода – равномерное распределение клеток в счетной камере. У здорового человека в 1 мкл пунктата костного мозга при подсчете в счетной камере обнаружено (по данным разных авторов) 63 ± 10 и 83 ± 13,86 мегакариоцитов. У здоровых детей в возрасте от 5 месяцев до 3 лет общее количество мегакариоцитов составляет около 116 ± 10,8 в 1 мкл пунктата.

Подсчет в мазках по полям зрения. В мазках пунктата костного мозга подсчитывают мегакариоциты при малом увеличении микроскопа с выведением средних цифр.

Неточность метода обусловлена тем, что в мазках мегакариоциты располагаются неравномерно, сосредоточиваясь больше по краям препарата и в конце мазка. У здорового человека в мазках пунктата костного мозга в 250 полях зрения содержится 5–12 мегакариоцитов.

Подсчет в мазках по отношению к числу всех ядерных клеток. В мазках пунктата костного мозга при выведении миелограммы (подсчет не менее 500 клеток) отмечается процент мегакариоцитов. Недостаток метода тот же, что и при подсчете в мазках по полям зрения.

В среднем у здорового человека в пунктате костного мозга количество мегакариоцитов составляет 0,1–0,2%. Данные разных авторов свидетельствуют о широких колебаниях процента мегакариоцитов в мазках пунктата костного мозга – от 0 до 1,2%, в среднем он составляет 0,4 × 0,18%.

Резкое увеличение количества мегакариоцитов в костном мозге наблюдается при миелопролиферативном синдроме, особенно при полицитемии, а также при идиопатической тромбоцитопенической пурпуре (болезни Верльгофа), при циррозе печени с явлениями гиперспленизма.

Увеличение числа мегакариоцитов выявляется при злокачественных новообразованиях, симптоме геморрагической тромбоцитемии, после острой кровопотери. Уменьшение количества мегакариоцитов характерно для большинства системных гиперпластических процессов.

Морфология клеток костного мозга.

Кроветворные клетки первых трех классов морфологически неразличимы. Они имеют круглую или неправильную форму, ядро фиолетовое, округлое или почкообразное, с одним или двумя ядрышками. Светло-голубой узкий ободок цитоплазмы не содержит зернистости. Эти клетки существуют в бластной и лимфоцитоподобной формах.

Бластные клетки имеют ядро нежной структуры, с одним или несколькими ядрышками. Ядра лимфоцитоподобных форм плотные. Возможен переход одной формы в другую. Принадлежность клеток к тому или иному классу из первых трех определяется цитохимическими или культуральными методами.

Начиная с четвертого класса клетки обладают характерными особенностями, которые различимы при микроскопии.

Морфология ретикулярных клеток.

В кроветворных органах наряду с дифференцированной тканью (паренхима), состоящей в костном мозге из клеток миелоидного ряда, а в селезенке и лимфатических узлах – из клеток лимфатического ряда, имеются клетки ретикулярной ткани (строма). Среди ретикулярных элементов различают следующие формы.

Малые лимфоидные ретикулярные клетки имеют сходство с лимфоцитами, и эти два типа клеток не всегда можно дифференцировать. У малых лимфоидных ретикулярных клеток ядро круглое или овальное с четко очерченными границами. Изредка в ядрах можно обнаружить ядрышки, окрашенные в синий цвет. Цитоплазма окружает ядро узким ободком и окрашивается в синий цвет.

Встречаются малые лимфоидные ретикулярные клетки с биполярно вытянутой цитоплазмой с бахромчатыми краями и несколько удлиненными ядрами. В цитоплазме иногда содержится немного азурофильных зерен.

В норме малые лимфоидные ретикулярные клетки обнаруживаются в пунктате костного мозга и лимфатических узлов только как редкие экземпляры (0,1–0,3%), а в селезенке – от 1 до 10%.

Большие лимфоидные ретикулярные клетки – гемогистобласты величиной от 15 до 30 мкм. Благодаря синцитиальному расположению клетки не имеют правильной формы. Ядро клеток круглое или овальное с нежно-сетчатой ажурной структурой, светлое, содержит 1–2 ядрышка. Цитоплазма обильная и окрашивается в светло-голубой или серовато-голубой цвет, иногда с нежной, пылевидной или палочковидной азурофильной зернистостью. В норме в кроветворных органах большие лимфоидные ретикулярные клетки обнаруживаются в виде единичных экземпляров.

Клетки Феррата представляют собой ретикулярные клетки, неспособные в нормальных условиях к дальнейшему развитию и приобретающие способность к кроветворению лишь при определенных патологических условиях. Существует также мнение, что клетки Феррата – это промиелоциты, раздавленные и распластанные при приготовлении мазков. Клетки Феррата имеют крупные размеры, достигающие 35–40 мкм, неправильную, чаще всего полигональную, форму. Ядро круглое, бледное, занимает около половины клетки и, как правило, располагается эксцентрично. Нити базихроматина грубоватые, расположены широкими, переплетающимися полосами с просветами бесцветного оксихроматина. В ядре имеются хорошо очерченные 1–3 ядрышка. Цитоплазма широкая, часто с расплывчатыми очертаниями, окрашивается в светло-голубой цвет. В ней имеется большое количество мелкой, пылевидной азурофильной зернистости. Клетки Феррата в кроветворных органах встречаются в норме в единичных экземплярах. Их количество резко возрастает при заболеваниях, сопровождающихся гиперплазией ретикулогистиоцитарной системы.

Макрофаги представляют собой фагоцитирующие ретикулярные клетки. В периферической крови они известны как гистиоциты, однако правильнее их называть макрофагами. Клетки различной величины, в основном больших размеров. Молодые клетки имеют круглое или овальное ядро нежной структуры, содержащее иногда 1–2 ядрышка. Цитоплазма голубого цвета, нерезко очерчена. У более зрелых клеток ядро грубее, цитоплазма широкая, голубого цвета и нерезко очерчена, содержит различные включения: азурофильные зерна, обломки клеток, эритроциты, глыбки пигмента, жировые капли, иногда бактерии и т. п. Встречаются макрофаги недеятельные, не имеющие в цитоплазме включений (макрофаги в покое).

Липофаги – это макрофаги, фагоцитирующие жиры и липоиды. Они могут быть различной величины, достигая 40 мкм и более. В цитоплазме имеется обильная мелкая вакуолизация за счет содержания капель жира, растворившихся во время фиксации препарата в спирте. В некоторых случаях мелкие капли могут сливаться, образуя одну большую, которая заполняет всю цитоплазму и оттесняет ядро к периферии. При добавлении Судана 3 капли жира окрашиваются в оранжевый цвет. В норме в пунктате костного мозга, лимфатического узла, селезенки встречаются единичные липофаги. Большое количество их обнаруживается при апластических процессах в кроветворной ткани.

Атипичные ретикулярные клетки встречаются при ретикулезах – лейкозах. Среди них различают следующие виды:

1) клетки небольших размеров, ядра неправильной формы, занимают большую часть клетки, богаты хроматином, некоторые имеют ядрышки. Цитоплазма в виде небольшого ободка бледно-синего цвета, вакуолизирована, иногда содержит темно-фиолетовую зернистость. Клетки могут встречаться в синцитиальной связи;

2) клетки, схожие с большими лимфоидными ретикулярными клетками (гемогистобласты), больших размеров, неправильной полигональной формы. Ядра их чаще круглые или овальные, нежной структуры, окрашиваются в светло-фиолетовый цвет. Имеют 1–2 ядрышка. Цитоплазма широкая, без четких контуров, окрашивается в светло-синий цвет. Эти клетки чаще всего встречаются в синцитии;

3) клетки, схожие с моноцитами, имеющие нежные ядра с многочисленными извилинами в них, а иногда разделенные на части, окаймленные как бы воздушной, легкой цитоплазмой. В некоторых ядрах также обнаруживаются ядрышки;

4) гигантские многоядерные клетки и клетки с резко выраженной плазматизацией, приобретающие благодаря этому сходство с миеломными клетками.

Ретикулярные клетки, встречающиеся при инфекционном мононуклеозе:

1) клетки больших размеров (до 20 мкм и более) с молодой нежно-губчатой структурой ядра (в котором иногда обнаруживаются ядрышки) и широкой цитоплазмой, окрашивающиеся то в более темный, то в более светлый синий цвет;

2) клетки меньших размеров (до 10–12 мкм) с ядром круглой или бобовидной формы, нередко расположенным эксцентрично, имеющим грубопетлистое строение. Цитоплазма резко базофильна, более интенсивно окрашена по периферии. Встречаются клетки, особенно в разгаре болезни, и со светлой, еле заметной цитоплазмой, в которой иногда имеются азурофильные зерна;

3) клетки размерами крупнее, чем зрелые лимфоциты, с моноцитоидным ядром и довольно интенсивно окрашенной в синий цвет цитоплазмой, в которой также иногда обнаруживают азурофильные зерна. При этом заболевании ретикулярные клетки называют атипичными мононуклеарами.

Клетки Гоше относятся к ретикулярным элементам, макрофагам, содержащим вещество керазин (из группы цереброзидов). Клетки больших размеров (около 30–40, некоторые до 80 мкм) имеют круглую, овальную или полигональную форму. Ядро занимает меньшую часть клетки и обычно оттеснено к периферии. Оно грубое, комковатое, местами пикнотичное. Иногда наблюдаются многоядерные клетки. Цитоплазма светлая, широкая, занимает большую часть клетки. Наличие керазина создает впечатление слоистости цитоплазмы. Реакция на жир всегда отрицательна. Описанные клетки обнаруживают в пунктатах костного мозга, селезенки, лимфатических узлов и других органов, при керазиновом ретикулезе, болезни Гоше. Клетки, подобные клеткам Гоше, встречаются при болезни Пика—Нимана (фосфатидный липоидоз) и болезни Шюллера—Крисчена (холестериновый липоидоз). Различить их более точно можно только посредством химического исследования содержащихся в них веществ.

Тучные (тканевые) клетки (базофилы соединительной ткани) образуются из ретикулярных клеток. Размер клеток колеблется от 10 до 14 мкм. Ядро круглое или овальное, неопределенной структуры, окрашено в красновато-фиолетовый цвет. Цитоплазма широкая с обильной зернистостью темно-фиолетового цвета. В норме они встречаются в пунктате лимфатического узла и селезенки до 0,1%. В большом количестве обнаруживаются в костном мозге при базофильных лейкозах.

Остеобласты – клетки больших размеров (20–35 мкм). Форма их удлиненная, неправильная или цилиндрическая. Ядро клеток круглое или овальное, занимает меньшую часть клетки. Расположенное большей частью эксцентрично, оно как бы выталкивается из клетки. Иногда можно видеть, что ядро только одним краем примыкает к цитоплазме клетки, остальной же частью лежит вне ее. Ядро состоит из большого количества базихроматина в виде небольших комочков и небольшого количества оксихроматина. Окрашивается ядро в темный фиолетово-красный цвет; в нем имеются небольшие бледно-голубые ядрышки, иногда различной величины. Цитоплазма больших размеров и по периферии имеет пенистое строение, окрашивается в цвета от синего с фиолетовым оттенком до серо-голубого. Нередко участки цитоплазмы одной и той же клетки приобретают разные оттенки. Остеобласты имеют некоторое сходство с миеломными клетками и проплазмоцитами. Остеобласты принимают участие в образовании костной ткани. В норме в пунктате костного мозга они почти не встречаются.

Остеокласты – клетки, которые в эмбриональном периоде участвуют в развитии костной ткани. Во взрослом организме появление их связано с процессом рассасывания костной ткани. Величина и форма их очень разнообразны. Наиболее часто встречаются крупные экземпляры, достигающие 60–80 мкм и больше. Форма клеток овальная, полигональная, чаще неправильная, с большим количеством (чаще 6–15, а иногда до 100) ядер. Ядра группируются или располагаются в цитоплазме разбросанно. Размер ядер достигает 12 мкм. Форма их круглая или овальная. Они окрашиваются в светло-фиолетовый цвет. В ядрах обнаруживаются одиночные маленькие ядрышки.

Цитоплазма при окраске становится светло-синей, фиолетовой или розоватой. Иногда можно наблюдать в одной и той же клетке различную окраску. Цитоплазма по периферии клетки слабо контурируется, иногда образует широкие отростки, постепенно сливающиеся с общим фоном препарата. Вокруг ядра отмечается узкая зона просветления. В некоторых клетках в цитоплазме имеются включения в виде зерен или небольших глыбок неправильной формы (гемосидерин). Остеокласты имеют некоторое сходство с клетками Лангханса, зрелыми мегакариоцитами и гигантскими клетками инородных тел.

Остеокласты обнаруживаются в пунктате костного мозга в местах переломов костей, при болезни Педжета, саркомах, метастазах рака в кости и некоторых других заболеваниях, связанных с рассасыванием костной ткани.

Морфология клеток гранулоцитарного ростка.

К этим клеткам относят миелобласт (4-й класс), промиелоцит, миелоцит, метамиелоцит и палочкоядерный гранулоцит (5-й класс), сегментоядерный гранулоцит (6-й класс).

Миелобласт имеет диаметр 15–20 мкм. Ядро округлой формы, занимает большую часть клетки, окрашено в красно-фиолетовый цвет, имеет нежно-сетчатую структуру хроматина, содержит от 2 до 5 ядрышек сине-голубого цвета. Ядро окружено узким пояском ярко-синей (базофильной) цитоплазмы, в которой содержится в небольшом количестве красная (азурофильная) зернистость. В норме в костном мозге миелобластов содержится 0,2–1,7%. При острых лейкозах и тяжелых обострениях хронических миелозов встречаются патологические миелобласты в виде микрогенераций с утраченной нежно-сетчатой структурой ядра и выраженным его полиморфизмом.

Промиелоцит – крупная клетка диаметром 25 мкм. Ядро овальной формы, занимает большую часть клетки, окрашено в светло-фиолетовый цвет, имеет тонкую сетчатую структуру, в которой различимы ядрышки. Цитоплазма широкая, голубого цвета, содержит обильную красную, фиолетовую или коричневую зернистость. По особенностям зернистости можно определить видовую направленность промиелоцита: нейтрофильную, эозинофильную или базофильную. В норме в пунктате костного мозга количество промиелоцитов колеблется в пределах 1–4,1%.

Миелоцит является более зрелой клеткой гранулоцитарного ряда диаметром 12–16 мкм. Ядро овальной формы, расположено эксцентрично, светло-фиолетового цвета. Его структура более грубая, чем у промиелоцита, ядрышки не выявляются. Цитоплазма окружает ядро широким поясом, окрашена в светло-голубой цвет, содержит зернистость. В зависимости от характера зернистости различают миелоциты нейтрофильные, эозинофильные и базофильные. Нейтрофильная зернистость мелкая, сине-фиолетового цвета, эозинофильная – крупная, желтовато-красного цвета, базофильная – темно-синего цвета.

При патологических процессах, особенно при лейкозах, в миелоцитах отмечается несоответствие в развитии ядра и цитоплазмы, а также зернистости клеток. В норме в костном мозге количество нейтрофильных миелоцитов колеблется от 5,4 до 14,5%, эозинофильных – от 0,4 до 3% и базофильных – от 0,1 до 0,5%.

Метамиелоцит – клетка диаметром 12–13 мкм с бобовидным эксцентрично расположенным ядром бледно-фиолетового цвета, структура его компактна. Ядро окружено по периферии широкой цитоплазмой розового цвета, содержащей нейтрофильную, эозинофильную или базофильную зернистость. В норме в костном мозге содержится: нейтрофильных метамиелоцитов – от 6,5 до 15%, эозинофильных – от 0,2 до 2%, базофильных – от 0 до 0,1%.

Палочкоядерный гранулоцит имеет диаметр 10–12 мкм. Ядро изогнуто в виде палочки или подковы, фиолетового цвета, с грубой структурой. Цитоплазма имеет розовую окраску, занимает большую часть клетки, содержит фиолетовую зернистость. У эозинофильного палочкоядерного гранулоцита цитоплазма практически не видна из-за обильной крупной желтовато-красного цвета зернистости. Палочко-ядерная стадия базофильного гранулоцита обычно не встречается.

Сегментоядерный гранулоцит такого же размера, как и палочкоядерный. Ядро разделено на отдельные сегменты, соединенные тонкими перемычками. Количество сегментов колеблется от 2 до 5. Ядро фиолетовое, расположено в центре клетки. Сегментоядерный нейтрофил имеет розовую (оксифильную) цитоплазму, в которой содержится мелкая фиолетовая зернистость. Ядро эозинофила состоит обычно из двух сегментов, занимая меньшую часть клетки. Большая часть клетки заполнена крупной, густо расположенной желтовато-красной зернистостью. Ядро базофила состоит, как правило, из трех сегментов. Светло-фиолетовая цитоплазма содержит крупную синего или темно-фиолетового цвета зернистость, которая местами наложена на ядро, в связи с чем его контуры нечеткие.

Морфология клеток лимфатического ростка.

К клеткам лимфатического ряда относят лимфобласт и плазмобласт (4-й класс), пролимфоцит и проплазмоцит (5-й класс), лимфоцит и плазмоцит (6-й класс).

Лимфобласт имеет диаметр 15–20 мкм. Ядро округлое, с нежно-сетчатой структурой хроматина, бледно-фиолетового цвета, расположено в центре. В ядре четко виды 1–2 ядрышка. Цитоплазма светло-синяя, окружает ядро узким ободком, не содержит зернистости. Участок цитоплазмы вблизи ядра имеет более светлую окраску (перинуклеарная зона).

В периферической крови и костном мозге у здорового человека лимфобластов не бывает. Их обнаруживают при лимфолейкозе в небольшом количестве. В норме в пунктате лимфатического узла содержится лимфобластов от 0,1 до 0,5%, а в пунктате селезенки – до 0,2%.

Пролимфоцит является небольшой клеткой диаметром 11–12 мкм. Ядро округлое, бледно-фиолетового цвета, с нежной сетью хроматина. В некоторых случаях может содержать остатки ядрышек. Цитоплазма голубая, окружает ядро в виде неравномерного ободка, иногда содержит азурофильную (красновато-фиолетовую) зернистость.

В норме в периферической крови и в костном мозге пролимфоциты могут встречаться в виде единичных экземпляров. В пунктате нормального лимфатического узла их содержится 65–80%, а в селезенке – до 60%.

Лимфоцит – зрелая клетка диаметром от 7–9 до 12–13 мкм в зависимости от величины цитоплазмы. Ядро округлое, темно-фиолетового цвета, компактное, иногда имеет вдавление. Ядрышек не содержит. Выявляются малые лимфоциты с узким ободком голубой цитоплазмы, которая практически незаметна, средние и большие лимфоциты, цитоплазма которых занимает большую часть клетки, менее интенсивно окрашена и содержит азурофильную зернистость. Вокруг ядра всегда определяется перинуклеарная зона. Содержатся в костном мозге в количестве 4,4–13,7%.

Плазмобласт – крупная клетка диаметром 16–20 мкм с округлым, центрально или эксцентрично расположенным большим ядром, имеющим нежную структуру и несколько ядрышек. Цитоплазма ярко-синего цвета, окружает ядро широким поясом. Вокруг ядра выражена перинуклеарная зона. В норме эти клетки могут содержаться в пунктате лимфатического узла и селезенки в виде единичных экземпляров.

Проплазмоцит – клетка диаметром 10–20 мкм. Ядро округлое, компактное, расположено эксцентрично. В ядре чередуются темно– и светло-фиолетовые участки, которые расположены радиально от центра к периферии, что напоминает расположение спиц в колесе, – колесовидная структура ядра. Ядрышки отсутствуют. Цитоплазма интенсивного синего цвета, широкая, вакуолизированная. Хорошо видна перинуклеарная зона.

Плазмоцит – зрелые плазматические клетки (клетки Унна), разнообразные как по форме, так и по размерам (от 8 до 20 мкм). Ядро имеет почти постоянную величину, а меняется большей частью величина цитоплазмы. Ядро круглое или чаще овальное и расположено эксцентрично, имеет характерную грубую колесовидную структуру. Цитоплазма окрашивается в интенсивный синий цвет с ясным просветлением вокруг ядра, однако встречаются клетки с более светлой цитоплазмой и менее выраженной перинуклеарной зоной. В цитоплазме могут быть различной величины вакуоли, расположенные, как правило, в ее периферической части и придающие ей ячеистое строение. Нередко встречаются многоядерные плазматические клетки, содержащие 2–3 ядра и более одинаковой или различной величины. Плазматические клетки больших размеров могут иметь цитоплазму, окрашенную в серо-голубой цвет, с менее отчетливой перинуклеарной зоной или с ее отсутствием.

В норме в пунктате костного мозга находят зрелые плазматические клетки в количестве до 1,8%, а в пунктате лимфатического узла и селезенки – плазмобласты, проплазмоциты и зрелые плазматические клетки в количестве 0,1–0,8%.

В периферической крови в норме плазматических клеток не находят. Они появляются в крови при ряде инфекций (кори, краснухе, ветряной оспе), сывороточной болезни, некоторых болезнях кожи, инфекционном мононуклеозе, агранулоцитозе, туберкулезе, лимфогранулематозе, тяжелом сепсисе, крупозной пневмонии, актиномикозе, циррозе печени, миеломной болезни. При некоторых формах миеломной болезни молодые плазматические клетки могут поступать в периферическую кровь в большом количестве. Морфология плазматических клеток при миеломной болезни имеет характерные черты – миеломные клетки.

Миеломные клетки имеют большие размеры, достигающие иногда 40 мкм и более в диаметре. Ядро нежное, содержит 1–2 больших или несколько мелких ядрышек, окрашенных в голубой цвет. Нередко встречаются клетки с 3–5 ядрами. Цитоплазма больших размеров, окрашивается в различные цвета: светло-голубой, светло-фиолетовый, интенсивно-фиолетовый, а иногда красноватый, обусловленный присутствием гликопротеидов. Околоядерное просветление выражено нечетко или отсутствует. В редких случаях находят 1–2 гиалиновых включения – тельца Русселя величиной 2–4 мкм. При окраске азур-эозином они приобретают красный цвет.

Морфология клеток моноцитарного ростка.

К клеткам моноцитарного ряда относят монобласт (4-й класс), промоноцит (5-й класс), моноцит (6-й класс).

Монобласт имеет диаметр 12–20 мкм. Ядро округлое, иногда дольчатое, имеет нежную структуру, светло-фиолетовую окраску. Содержит 2–5 ядрышек. Цитоплазма нежно-голубая, занимает меньшую часть клетки.

Промоноцит имеет диаметр 12–20 мкм. Ядро крупное, рыхлое, бледно-фиолетовое, может содержать остатки ядрышек. Цитоплазма широкая, серовато-фиолетового цвета.

Моноцит является зрелой клеткой диаметром 12–20 мкм. Ядро рыхлое, светло-фиолетовое. Форма ядра может быть различной: бобовидной, дольчатой, подковообразной. Цитоплазма серовато-фиолетового цвета, широкая, светлая, может содержать обильную мелкую азурофильную зернистость.

В норме в периферической крови и в костном мозге монобластов и промоноцитов, как правило, не бывает. Встречаются они как временное явление при острых инфекциях (например, при инфекционном мононуклеозе) и при других заболеваниях, сопровождающихся высоким моноцитозом.

Морфология клеток эритроцитарного ростка.

К клеткам эритроцитарного ростка относят эритробласт (4-й класс), пронормоцит, нормоцит, ретикулоцит (5-й класс), эритроцит (6-й класс).

Эритробласт имеет диаметр 20–25 мкм. Ядро нежной структуры, округлое, занимает большую часть клетки, красновато-фиолетового цвета, содержит 1–5 ядрышек. Цитоплазма насыщенного синего цвета, не содержит зернистости. Вокруг ядра определяется зона просветления.

Эритробласты встречаются в нормальном костном мозге в количестве 11,4–29,4%, а в периферической крови – только при патологических состояниях.

Патологические формы эритробластов наблюдаются при некоторых патологических состояниях (остром сепсисе, апластических анемиях, остром лейкозе, тяжелых инфекционных заболеваниях, после облучения и др.). Изменяется морфология ядра и цитоплазмы клеток различных стадий созревания. Ядро теряет нормальную структуру, хроматин становится однородным. Встречаются эритробласты с плотным, пикнотичным базихроматином, как у зрелых нормобластов. Цитоплазма может быть вакуолизированной. Цвет ее не соответствует степени созревания ядра.

Мегалобласты – большие эмбриональные эритробласты. В костном мозге и периферической крови появляются в постэмбриональной жизни только при патологических состояниях, связанных с дефицитом гемопоэтического фактора – витамина В₁₂, фолиевой кислоты. Мегалобласты в зависимости от степени созревания делятся на промегалобласты и базофильные, полихроматофильные, оксифильные мегалобласты.

Пронормоцит – клетка диаметром 12–18 мкм. Ядро имеет более грубую структуру, чем у эритробласта, но еще сохраняет нежную сетчатую структуру. Ядрышки отсутствуют. Цитоплазма барофильная, не содержит зернистости.

Нормоцит имеет диаметр 8–12 мкм. В зависимости от степени насыщенности их цитоплазмы гемоглобином различают базофильный, полихроматофильный и оксифильный нормоциты. Самые крупные – базофильные нормоциты, наименьший размер имеют оксифильные нормоциты. Ядра этих клеток имеют грубую структуру, окрашены в темно-фиолетовый цвет. Цитоплазма базофильного нормоцита – синяя, полихроматофильного – серовато-фиолетовая, оксифильного – розовая.

Нормоцит вызревает в эритроцит через стадию ретикулоцита – молодого предшественника эритроцита, сохранившего остатки базофильной субстанции (РНК) цитоплазмы, которая выявляется при помощи специальной окраски.

Ретикулоцит – клетка диаметром 9–11 мкм. В зависимости от способа окраски может быть голубого или зеленого цвета. Содержит нитчато-сетчатую субстанцию, которая окрашена в синий цвет.

Эритроцит – зрелая клетка периферической крови диаметром 7–8 мкм, розово-красного цвета. Имеет форму двояковогнутого диска, что ведет к неравномерности в окраске – клетка более светлая в центре и более интенсивно окрашена по периферии.

Морфология клеток мегакариоцитарного ростка.

К клеткам мегакариоцитарного ростка относят мегакариобласт (4-й класс), промегакариоцит и мегакариоцит (5-й класс), тромбоцит (6-й класс).

Мегакариобласт имеет диаметр 20–25 мкм. Ядро округлое, с нежной структурой, красновато-фиолетового цвета, имеет ядрышки. Цитоплазма небольшая, интенсивно барофильная, не содержит зернистости. Вокруг ядра заметна зона просветления.

Промегакариоцит – значительно более крупная клетка, чем мегакариобласт. Ядро грубой структуры, не содержит ядрышек. Цитоплазма базофильная, занимает большую часть клетки, зернистость в ней отсутствует.

Мегакариоциты – гигантские клетки костного мозга. Мегакариоцит представляет собой гигантскую клетку костного мозга диаметром 60–120 мкм. Ядро имеет грубую структуру, различной, в некоторых случаях причудливой, формы. Цитоплазма отличается очень большими размерами, содержит зернистость розовато-фиолетового цвета. От цитоплазмы мегакариоцита отшнуровываются тромбоциты.

Тромбоциты (кровяные пластинки) – зрелые элементы периферической крови, имеющие небольшие размеры (1,5–3 мкм), округлую или овальную форму. Периферическая часть – гиаломер – светлого цвета, центральная часть – грануломер – розовато-фиолетового цвета, содержит мелкие гранулы.

При исследовании красного костного мозга подсчитывают процентное содержание костномозговых элементов (табл. 53).

Таблица 53.

Показатели миелограммы.